Transkriptionsinitiierung: RNA-Polymerase bindet an den DNA-Transkriptionspromotor, Der Prozess der Bildung eines funktionellen Transkriptionsinitiationskomplexes. Es wurde transkribiert Der geschwindigkeitsbestimmende Schritt im Prozess ist der erste und wichtigste Schritt bei der Regulierung der Genexpression. Bühne.

Promotor: Das DNA-Molekül wird durch RNA-Polymerase und Transkriptionsregulatoren geschützt Erkennt und bildet den Transkriptionsinitiationskomplex.

Starker Promotor: ein Promotor mit hoher Affinität zur RNA-Polymerase, die Sowohl die Häufigkeit als auch die Effizienz der anfänglichen Transkription sind hoch.

Motiv (Promotersequenz der Region -10): extrem konservierte Konsensussequenz Säule, deren Mitte sich etwa 10 bp stromaufwärts der Transkriptionsstartstelle befindet.

Bindungsstelle (B-Stelle): RNA-Polymerase bindet an der Erkennungsstelle Bewegen Sie nach dem Klicken den Schieberegler in den Bereich -10, wählen Sie die Vorlagenkette aus und schließen Sie sie kombinieren.

Kernpromotor

Transkriptionsstartpunkt (I-Site): 1 Site.

Upstream-Kontrollelement: befindet sich in der -70~-40-Region stromaufwärts des Kernpromotors Enthält eine Hochregulierung, die an den CAP-cAMP-Komplex bindet und die Transkription aktiviert Kontrollpunkt.

vorgeschaltete Steuerelemente

DNA-Footprinting-Methode: Hinzufügen der RNA-Polymerisation zum Genreaktionssystem Enzym ohne Zugabe von NTP kann die RNA-Polymerase nur an den Promotor binden , kann die Transkription nicht fortgesetzt werden. Fügen Sie dem System DNase-Verdauung hinzu DNA, ein durch RNA-Polymerase (Promotor) geschützter DNA-Abschnitt Sequenz) können so an Nitrozellulosefilter gebunden werden Die DNA wird aus dem Komplex freigesetzt und ihre Sequenz bestimmt.

Der prokaryotische Promotor ist etwa 40 Basen lang und enthält die -10-Region Die konservierte Sequenz der Pribnow-Box ist TATAAT, -35-Region Die konservierte Sequenz der Sextama-Box ist TTGACA und die der beiden anderen Boxen Zwischen ihnen befindet sich eine Spacer-Sequenz von 17 ± 1 bp. Die Erhaltung der Spacer-Sequenz ist förderlich Initiierung der RNA-Polymerase. Die Abstandsmutation nähert sich 17 bp → eine Hochregulierungsmutation, die die Promotorfunktion verbessert Abstand der Mutation von 17 bp → Herunterregulierungsmutation, die die Promotoraktivität schwächt

-35-Sequenz ist die Bindungserkennungsstelle des Rho-Faktors im RNA-Polymerase-Holoenzym Punkt. Die Position der -10-Region ist reich an A/T, und das Schmelzen der Promotorregion erfolgt in - In Region 10 wählt der Rho-Faktor den Matrizenstrang aus und veranlasst die RNA Die Polymerase bindet an den Matrizenstrang.

Der wesentliche Unterschied zwischen starken und schwachen Promotoren ist der Grad der Ähnlichkeit mit der konservierten Sequenz -35 (TTGACA) und der konservierten Sequenz -10 (TATAAT). Wenn die Mutation dazu führt, dass der Promotor von der Standardsequenz abweicht, ist der Promotoreffekt schwach und die Mutation erscheint als Down-Regulationsmutation; andernfalls erscheint die Mutation als Up-Regulationsmutation.

Cis-Element: bindet an trans-wirkende Faktoren und existiert mit Zielgenen In der Nähe befindet sich die strukturell konservierte DNA-Sequenz, die die Transkription des Zielgens reguliert Aufführen. Zum Beispiel: Verstärker, Schalldämpfer. Nicht direkt mit der RNA-Polymerase verbunden Interagieren Sie mit anderen Proteinen, um sie zu aktivieren oder zu organisieren Transkriptionsinitiierung von Strukturgenen durch RNA-Polymerase.

Transaktive Faktoren: binden an cis-aktive Elemente und regulieren Gene von Transkriptionsfaktoren. Wie Aktivatorproteine, Repressorproteine ​​und ncRNA

Haushaltsgene: notwendig, um die grundlegenden Stoffwechselprozesse der Zellen aufrechtzuerhalten, Ausgeprägt in verschiedenen Zelltypen und Zellwachstumsstadien (konstitutiv). Expression) Gene.

Luxusgene: für Zelldifferenzierung, biologische Entwicklung und Anpassung an die Umwelt Gene, die aufgrund der Umgebung eine Expression (induzierbare Expression) erfordern

Strukturgen: Jedes Gen, das für Protein oder RNA kodiert.

Regulatorische Gene: Gene, die direkt an der Regulierung der Expression anderer Gene beteiligt sind.

Eukaryotische RNA wird von drei RNA-Polymerasen transkribiert (Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ)Abgeschlossen

RNA-Polymerase ist ein Enzym, das RNA synthetisiert, indem es einen DNA-Strang oder RNA als Matrize und Ribonukleosidtriphosphat als Substrat über eine Phosphodiesterbindung polymerisiert, da es mit der genetischen Information der Gen-DNA in der Zelle transkribiert wird RNA, sie wird auch Transkriptase genannt.

Das Kernenzym der RNA-Polymerase besteht aus zwei α-Untereinheiten, einer β-Untereinheit, Besteht aus einer β‘-Untereinheit. Das Kernenzym ist auf elektrostatische Kräfte angewiesen, um mit der DNA zu interagieren Es kommt zu einer unspezifischen und unspezifischen Bindung, die für die RNA-Kette verantwortlich ist Transkriptionsverlängerung.

Das Holoenzym der RNA-Polymerase besteht aus dem Kernenzym und der Rho-Untereinheit. Das Holoenzym beruht auf einer spezifischen räumlichen Struktur und promotorspezifischen Basensequenzen. Säulen binden spezifisch und sind für die Initiierung der RNA-Transkription verantwortlich.

Alle Arten von RNA werden von einer RNA-Polymerase transkribiert

Das Kernenzym der RNA-Polymerase enthält mindestens 4 funktionelle Stellen, nämlich Nicht-Matrizenstrang-Bindungsstelle (β‘), Matrizenstrang-Bindungsstelle (;β). Untereinheit), doppelsträngige DNA-Abwicklungsstelle und doppelsträngige DNA-Umlagerungsstelle Punkt.

RNA-Polymerase I: befindet sich im Nukleolus vor der Transkription von 45S-rRNA Erwähnung, die die Gene 5.8S, 18S und 28SrRNA kodiert (Ⅰ Typ-Gen)

RNA-Polymerase II: befindet sich im Nukleoplasma und transkribiert alle kodierenden Gene mRNA und die meisten kleinen Kern-RNAs (snRNAs) (Typ-II-Gene). Weil)

RNA-Polymerase III: befindet sich im Nukleoplasma und transkribiert tRNA, 5SRNA Gene und Gene, die U6-snRNA und verschiedene scRNAs (Typ III) kodieren Gen)

1. Erkennung der TATA-Box durch TF II-Faktor

2. TF Ⅱ B dient als Brückenfaktor zwischen TF Ⅱ D und RNA-Polymerase. Promotor, der hohe Konzentrationen von RPB um den Promotor herum in TF Ⅱ F anreichert RAP30 und RAD25 in TF II H sind ATPase Aktive DNA-Helikase. Bilden Sie den grundlegenden Transkriptionsinitiationskomplex

3. Die Kinaseaktivität von H ist für das Auftreten von hochfrequentem Phosphat bei Typ-II-A-CTD von RPB verantwortlich. Durch die Ansäuerung werden hochtranskriptionell aktive RNA-Polymere in Typ IIO umgewandelt Enzyme, die den vollständigen Transkriptionsinitiationskomplex bilden.

Enhancer sind weitreichende positive regulatorische cis-Stellen in Eukaryoten. Keine Promotoraktivität, aber richtungsunabhängiger Verstärkereffekt und Standort. Keine Genspezifität, Gewebe- und Zellspezifität Spezifität.

Mit dieser Methode können Sie Chromatin über große Entfernungen (über 1 kb) verteilen. werden zu einem festen, kondensierten Heterochromatin-Zustand geformt und dadurch gehemmt Reguliert Regionen neben der Gentranskription.

Helix-Turn-Helix (HTH): Das Konzept besteht aus zwei α-Helices, Die α-Helix am Carboxylterminus bindet direkt an die Basenspezifität der großen DNA-Furche. Bei der Kombination kreuzt eine weitere α-Helix die große Furche und interagiert unspezifisch mit der DNA. kombinieren.

Zinkfinger: Es handelt sich um die „DNA-Bindungsdomäne“ des Transkriptionsfaktor-Zinkfinger-Proteins

Basische Domäne oder Leucin-Reißverschluss: Eine basische Domäne bezieht sich auf eine stark alkalische Substanz α-Helix, jeder Faktor, der eine Grunddomäne enthält, kann diese bilden Quelldimere oder Heterodimere. Daher kann die Grunddomäne symmetrisch existieren Kombinieren Sie es zu einer kurzen spiralförmigen Spirale, die als einfacher Reißverschluss bezeichnet wird. Leucin-Reißverschluss.

Die Stamm-Schleifen-Konformation in der RNA kann die Verlängerung des Komplexes verhindern, was dazu führt Die RNA-Polymerase pausiert und dissoziiert von der Matrize.

Der ρ-Faktor hat zwei strukturelle und funktionelle Domänen: 1. RNA-abhängiges Nukleosid drei Funktionelle Domäne der Phosphatase. 2. Beenden Sie die Transkription und interagieren Sie direkt mit der RNA-Polymerase Wirkung. Terminationseffizienz versus Selbstnukleotidstruktur und folgende palindromische Sequenz bezogen auf die stromabwärtige Reihenfolge der Säule.

Struktur und Spleißen von Typ-I-Introns

Struktur und Spleißen von Typ-II-Introns

Struktur und Spleißen von Spleißosomenmustern Kommt hauptsächlich im Kern der Prä-mRNA vor.

Transspleißen

alternatives Spleißen/alternatives Spleißen