Galería de mapas mentales 6Pruebas microbiológicas
Este es un mapa mental sobre microbiología de alimentos: 6 pruebas microbianas, incluida la determinación de la cantidad microbiana, la recolección y el procesamiento de muestras. Bioanálisis y tecnologías afines, etc.
Editado a las 2024-01-20 17:23:40,Este es un mapa mental sobre una breve historia del tiempo. "Una breve historia del tiempo" es una obra de divulgación científica con una influencia de gran alcance. No sólo presenta los conceptos básicos de cosmología y relatividad, sino que también analiza los agujeros negros y la expansión. del universo. temas científicos de vanguardia como la inflación y la teoría de cuerdas.
¿Cuáles son los métodos de fijación de precios para los subcontratos de proyectos bajo el modelo de contratación general EPC? EPC (Ingeniería, Adquisiciones, Construcción) significa que el contratista general es responsable de todo el proceso de diseño, adquisición, construcción e instalación del proyecto, y es responsable de los servicios de operación de prueba.
Los puntos de conocimiento que los ingenieros de Java deben dominar en cada etapa se presentan en detalle y el conocimiento es completo, espero que pueda ser útil para todos.
Este es un mapa mental sobre una breve historia del tiempo. "Una breve historia del tiempo" es una obra de divulgación científica con una influencia de gran alcance. No sólo presenta los conceptos básicos de cosmología y relatividad, sino que también analiza los agujeros negros y la expansión. del universo. temas científicos de vanguardia como la inflación y la teoría de cuerdas.
¿Cuáles son los métodos de fijación de precios para los subcontratos de proyectos bajo el modelo de contratación general EPC? EPC (Ingeniería, Adquisiciones, Construcción) significa que el contratista general es responsable de todo el proceso de diseño, adquisición, construcción e instalación del proyecto, y es responsable de los servicios de operación de prueba.
Los puntos de conocimiento que los ingenieros de Java deben dominar en cada etapa se presentan en detalle y el conocimiento es completo, espero que pueda ser útil para todos.
Microorganismos en los alimentos y sus Detección de metabolitos
Determinación del recuento microbiano.
recuento de placas estándar proceso estadístico
proceso de experimento
muestreo
dilución
dilución diez veces
Inoculación: 2-3 diluciones en serie, controles paralelos
método de vertido
Método de recubrimiento
Detecta bacterias sensibles al calor.
Más adecuado para bacterias estrictamente aeróbicas.
La morfología de la colonia es obvia y se pueden observar las características del grupo.
No confundir con partículas de comida.
Las colonias tienden a superponerse y mezclarse.
nutrir
medio, condiciones
Cultivo invertido: pérdida de peso media inferior al 15%
Evita que gotean gotas de agua.
Prevenir el crecimiento de bacterias.
cuenta colonial
Seleccione una placa con un recuento de colonias bacterianas adecuado, de 30 a 300 UFC para bacterias y de 10 a 150 UFC para moho/levadura.
Métodos: observación a simple vista, contador de colonias.
Identificar colonias: Las colonias son demasiado pequeñas o similares a las partículas de la muestra: método de reducción de colorante, TTC (tetrazolio rojo, medio cromogénico), características bacterianas.
calcular
Informe, dos cifras significativas, el control en blanco tiene resultados de prueba de colonias no válidos
significado
Determinar el grado de contaminación microbiana y la calidad de la higiene.
Predecir la vida útil de los alimentos
reflejar frescura
Monitorear la dinámica de crecimiento y reproducción.
Pruebas de productos biológicos: contaminación, probióticos.
Otros metodos
Método de película seca hidratada-medio de cultivo.
Principio: Sistema de medio de cultivo prefabricado, película seca de hidratación renovable, medio de cultivo, gel soluble en agua fría, indicador, rejilla impresa
Pasos de operación: dilución, inoculación, cultivo, recuento, informes.
ventaja
alta productividad
Pequeño error
Internacionalización: Aprobación de organismos oficiales
Rápido: de 6 a 14 horas se pueden estimar resultados precisos en 24 horas 3-5 días para confirmar los recuentos de moho y levaduras
medio de identificación
método de inoculación por rotación
De acuerdo con la espiral de Arquímedes como trayectoria de inoculación, inocular la muestra a un ritmo decreciente.
Inoculación automática en espiral, sistema de conteo.
Método de conteo: hay más colonias en el medio y menos alrededor de ellas. Calcule el número de colonias por unidad de área.
ventaja
Los resultados de la medición están altamente correlacionados con el SPC.
defecto
Método de determinación del número más cercano MPN
Utilice las funciones fisiológicas especiales de los microorganismos que se van a probar y utilice medios de cultivo selectivos (para reducir la interferencia) para determinar la presencia y abundancia de microorganismos.
Detección de microorganismos con propiedades nutricionales y metabólicas como coliformes
fácil de usar
Se pueden medir los microorganismos que no son dominantes en la comunidad microbiana.
coliformes
Bacterias intestinales, vinculadas a la contaminación fecal
Bacterias aeróbicas y anaeróbicas facultativas negativas no saccharomyces que fermentan la lactosa para producir ácido y gas en determinadas condiciones de cultivo.
Fermentación primaria: LST, fermentación secundaria BGLB para productores de gas
La importancia de detectar E. coli
Bacterias indicadoras de contaminación fecal para evaluar la calidad de la higiene de los alimentos
Evaluar el potencial de contaminación por bacterias patógenas entéricas, como Salmonella, Shiga.
Ventajas como bacteria indicadora
Muchas fuentes, grandes cantidades, alta tasa de detección
El tiempo de supervivencia externo es básicamente el mismo.
La resistencia a los fungicidas es básicamente la misma.
Fácil de operar, no se requieren equipos complicados
alta sensibilidad
Método de recuento de reducción de tinte (método de estimación)
Principio: Las células vivas contienen enzimas reductasas que pueden reducir combustibles específicos de un color a otro.
Reactivos de uso común
Azul de metileno
azul a blanco
resazurina
El azul oscuro se vuelve rosa, blanco
tetrazol
Incoloro a rojo
El tiempo de reducción es inversamente proporcional a la concentración microbiana y a menudo se utiliza para la higiene de la leche y la actividad del esperma.
ventaja
Fácil, rápido y económico
defecto
La capacidad reductora de los microorganismos es diferente y difícil de estimar. No es adecuado para alimentos que contengan reductasas.
Método de conteo microscópico directo DMC
tablero de conteo conteo directo
Cámara de recuento de células de Petrovholzer (bacterias en general), hemocitómetro (esporas de levadura/moho)
Cuente la cantidad de microorganismos en un volumen determinado, pero no pueda distinguir bacterias diversas.
ventaja
Análisis de morfología celular rápido y conveniente, diapositivas fáciles de guardar
defecto
Solo apto para muestras con alto contenido bacteriano, poca precisión y fácil de fatigar.
Otros metodos
Método de frotis con hisopo de algodón, método de muestreo
Detección de microorganismos de superficie.
Aplicado a alimentos, superficies de equipos, lugares públicos.
Método de filtración por membrana, concentración de muestra.
Las muestras que contienen muy pocas bacterias pueden enriquecer las bacterias y mejorar la tasa de detección.
No limitado por el volumen de muestra
Método de detección: SPC, recuento microscópico, combinado con método de tinción.
Métodos físicos, químicos, moleculares e inmunológicos.
física
Medición de impedancia
impedancia
En materiales biológicos con resistencia, inductancia y capacitancia, la impedancia que dificulta la medición de corriente se llama impedancia.
Principio: Los microorganismos cambian las propiedades eléctricas del medio de cultivo y el sustrato eléctricamente inerte se descompone en moléculas e iones electroactivos. La conductividad del medio de cultivo aumenta y la impedancia disminuye.
Cambios en la conductividad a lo largo del tiempo.
Tiempo de detección: el tiempo desde el cultivo hasta el cambio repentino en el valor de impedancia, inversamente proporcional al recuento bacteriano original.
Dedujo el recuento bacteriano original de microorganismos.
Los microorganismos tienen diferentes curvas de impedancia.
Identificación microbiana
método de impedancia directa
El medio de cultivo se coloca en un tubo de medición especial. Después de la inoculación con microorganismos, se insertan electrodos en el medio de cultivo para medir directamente los cambios en las propiedades eléctricas del medio de cultivo.
factores clave, medio de cultivo
Las bacterias probadas➕producen cambios de impedancia monitorizables
método de impedancia indirecta
El metabolismo microbiano produce dióxido de carbono, etc., para reflejar la actividad metabólica de los microorganismos.
El dióxido de carbono ingresa al tubo de ensayo y reacciona con el hidróxido de potasio para producir carbonato, lo que reduce su conductividad y registra el cambio en la conductividad.
ventaja
No es necesario optimizar el medio de cultivo (puede reaccionar sin electricidad)
Puede medir medios con alto contenido de sal
Microorganismos medibles que producen muy poco o ningún cambio medible en la conductividad, como la levadura.
Los propios alimentos medibles pueden interferir con la medición de la impedancia o incluso dañar los electrodos.
Microcalorimetría
Químico
Determinación de ATP
Fuente de energía para las células vivas, desaparece dos horas después de la muerte celular
El ATP celular es constante y su cantidad total es proporcional al número de bacterias, que se puede calcular.
El contenido de ATP de las células procarióticas en crecimiento exponencial suele ser de 2 a 6 nmol/mg de peso seco.
Medición precisa de ATP en células de la misma especie
Métodos comunes —Medición de ATP por sistema luciferasa
El ATP participa en el sistema luciferina-luciferasa, lo que hace que la luciferina emita luz, y la cantidad de luz emitida es proporcional al ATP.
Calcular el número de células en función de la intensidad de la luminiscencia.
Puede medir y detectar automáticamente rápidamente. Los resultados son consistentes con el método SPC, lo que ahorra tiempo.
solicitud
Determinación del recuento de bacterias en caldo de fermentación.
Prueba de muestra de orina
Ensayo de microbiología de superficie.
Radiometria
Principio: Las bacterias producen dióxido de carbono cuando metabolizan los carbohidratos, etiquetan los oligoelementos en glucosa u otras moléculas de azúcar y detectan el dióxido de carbono liberado.
La cantidad de radiación es proporcional al número de bacterias.
El tiempo de detección es inversamente proporcional al número de microorganismos.
contador de energía radiactiva
solicitud
Compruebe si hay problemas estomacales soplando aire.
Pruebas de microbiología de alimentos.
Huella dactilar e identificación de microorganismos alimentarios.
Huella digital: componentes químicos característicos, estructuras, diferencias de rendimiento y metabolitos específicos.
Patrón característico: identificable, único.
Reconocimiento de ácidos nucleicos
secuencia de bases de 16srRNA
El ARNr representa el 80% del ARN total.
Muchos segmentos están altamente conservados.
temporizador de evolución biológica
mapa filogenético
PCR
Reacción en cadena de la polimerasa, clonación libre de células, una técnica de biología molecular que amplifica fragmentos específicos de ADN fuera de las células
Detección de bacterias patógenas: fragmentos específicos, conservación.
Principio: bajo la catálisis de la ADN polimerasa, la cadena de ADN original se utiliza como plantilla y cebadores específicos se utilizan como punto de partida para la extensión. A través de pasos como la desnaturalización, la hibridación y la extensión, se produce el proceso de copia in vitro de la hija. Se lleva a cabo la cadena de ADN que es complementaria al ADN molde.
componentes de reacción
ADN molde: gen diana: un gen exclusivo del microorganismo
Par de cebadores: punto de partida y punto final de la replicación, especificidad de la replicación
dNTP:A,T,G,C
ADN polimerasa
Tampón de reacción, solución de sal de magnesio.
ventaja
Amplificación in vitro de fragmentos de ácidos nucleicos específicos.
Rápido, sensible y específico
Sistema automático de análisis microbiano.
Análisis microbiano totalmente automatizado
Principio: El instrumento fija el medio de cultivo de reacción bioquímica necesario para la identificación bacteriana en la tarjeta. Después del cultivo, el instrumento juzga la reacción mostrada y utiliza el método numérico para realizar la determinación.
Tarjeta de bacterias gramnegativas, tarjeta de bacterias grampositivas, tarjeta de levaduras
Sistema de identificación bacteriana API
métodos inmunológicos
Antígeno (Ag): Sustancia que puede inducir al sistema inmunológico a producir una respuesta inmune y reaccionar específicamente con los anticuerpos o células efectoras que produce in vivo o in vitro.
Determinantes antigénicos: grupos activos en la superficie de un antígeno.
Propiedades antigénicas
Antigenicidad: inmunogenicidad y reactogenicidad.
Heterogeneidad: proteína, azúcar, ácido nucleico (composición química), 5-10 ku efecto inmunológico deficiente (peso molecular)
Anticuerpo (Ab): tipo de principio activo que puede reaccionar específicamente con el antígeno que sintetizan y secretan las células B cuando el antígeno ingresa al cuerpo. Se encuentra principalmente en el suero.
Métodos de detección de antígenos y anticuerpos: detección de bacterias o toxinas.
reacción de aglutinación
Los anticuerpos conocidos identifican los antígenos
El antígeno granular se une al anticuerpo correspondiente, y tras un cierto tiempo en presencia de un dieléctrico, aparecen a simple vista pequeños trozos aglutinados.
reacción de precipitación
Reacción de neutralización
Tecnología de anticuerpos o antígenos marcados
Experimento Salmonella 1-2
Principio: Realizado en dos recipientes especiales, uno que contiene un medio líquido selectivo y el otro un medio semisólido no selectivo.
El antígeno y el anticuerpo se combinan para formar una banda inmune visible a simple vista.
Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzima ELISA
Antígeno de partículas: como bacterias, virus, etc.
Antígenos solubles: enterotoxinas, micotoxinas, etc.
cualitativo o cuantitativo
Operación simple y rápida
Principio experimental
Las enzimas se unen a anticuerpos o antígenos.
reacción específica entre antígeno y anticuerpo
Desarrollo del color del sustrato catalizado por enzimas, análisis cualitativo o cuantitativo a simple vista o con instrumentos.
Especificidad ➕ Amplificación de señal enzimática
Los materiales requeridos
soporte sólido
Antígeno o anticuerpo marcado con enzima
Peroxidasa de rábano picante, buena estabilidad.
fosfatasa alcalina
sustrato para la acción enzimática
O-fenilendiamina (amarilla)
Tetrametilbencidina (azul)
tipo
Método directo, método indirecto, ELISA sándwich: determinación de antígeno de partículas
Método de competición: determinación de antígenos de moléculas pequeñas como las micotoxinas.
sándwich ELISA (ELISA sándwich)
①Recubrimiento: Anticuerpo 1 ② Lavado: eliminar el exceso y los reactivos débilmente unidos. ③Agregue muestras para inspeccionar; ④ Lavado; ⑤Agregue el anticuerpo 2 marcado con enzima; ⑥ Lavado; ⑦Agregue sustrato; ⑧ Reacción de terminación
ventaja
Puede detectar múltiples muestras al mismo tiempo, puede automatizarse, ser simple de operar y comercializarse.
cromatografía de oro coloidal
principio
Ensayo reactivo de Limulus (hou)
Método sensible para la determinación de endotoxinas en las paredes celulares de bacterias negativas.
Principio: Reacción entre endotoxina y lisados disueltos en cangrejo herradura para formar un gel, cualitativo o semicuantitativo.
Bioanálisis y tecnologías relacionadas.
Selección de animales de experimentación.
Sensibilidad a la sustancia de prueba, sexo, edad, peso.
Método de administración de la sustancia problema
alimentación, agua potable;
Administración oral, cápsula
Inyección: intraperitoneal, subcutánea
Cirugía
Prueba de toxina botulínica
Procedimientos quirúrgicos en experimentos con animales.
tecnología de anillo de ligadura
Recogida y procesamiento de muestras.
Principios de muestreo a seguir
Determinar el plan de muestreo: oído nivel dos, nivel tres
Representatividad: realizado de forma aleatoria, representativo de todos los alimentos.
Operación aséptica para evitar la contaminación.
Mantener el estado original: volatilización, temperatura.
Justo a tiempo: muestreo y envío para inspección
Plan de muestreo
tipo
muestreo
n: El número de muestras que se deben recolectar para el mismo lote de productos.
Juicio de resultado
c: El valor de muestra máximo permitido que excede el valor m
m: Valor límite del nivel aceptable de indicadores microbianos
MEl valor límite máximo de seguridad de los indicadores microbiológicos.
Nivel 2
Nivel tres
peligro alimentario
Peligros de categoría I, alimentos para personas mayores, lactantes y niños pequeños y alimentos que pueden aumentar los peligros antes del consumo
Peligros de categoría II, alimentos que se consumen inmediatamente, los peligros permanecen básicamente sin cambios antes del consumo.
Peligros de categoría III, alimentos que se han calentado antes del consumo para reducir los peligros.
Importancia de los indicadores de inspección para los alimentos: general, media, grave