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inmunología clínica
Los puntos de conocimiento para el examen de título profesional intermedio en pruebas médicas incluyen anticuerpos monoclonales, reacciones de aglutinación, enfermedades autoinmunes, enfermedades inmunoproliferativas, reacciones de precipitación, etc.
Editado a las 2024-01-14 00:56:14,
- Breve historia del tiempo
Este es un mapa mental sobre una breve historia del tiempo. "Una breve historia del tiempo" es una obra de divulgación científica con una influencia de gran alcance. No sólo presenta los conceptos básicos de cosmología y relatividad, sino que también analiza los agujeros negros y la expansión. del universo. temas científicos de vanguardia como la inflación y la teoría de cuerdas.
- ¿Cuáles son los métodos de fijación de precios para los subcontratos de proyectos bajo el modelo de contratación general EPC
¿Cuáles son los métodos de fijación de precios para los subcontratos de proyectos bajo el modelo de contratación general EPC? EPC (Ingeniería, Adquisiciones, Construcción) significa que el contratista general es responsable de todo el proceso de diseño, adquisición, construcción e instalación del proyecto, y es responsable de los servicios de operación de prueba.
- Puntos de conocimiento que los ingenieros de Java deben dominar en cada etapa
Los puntos de conocimiento que los ingenieros de Java deben dominar en cada etapa se presentan en detalle y el conocimiento es completo, espero que pueda ser útil para todos.
inmunología clínica
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inmunología clínica
Introducción
Introducción
Función inmune
defensa
Eliminar microorganismos patógenos.
Mejorar
reacción de hipersensibilidad
debilitar
enfermedad de inmunodeficiencia
extranjero
autoestabilizante
Eliminar las células dañadas o senescentes.
Mejorar
enfermedad autoinmune
No puede ser usado por uno mismo
monitor
Eliminar células malignas mutadas o aberrantes.
debilitar
tumor maligno
Antitumoral
celúla
células derivadas de células precursoras linfoides
células NK
Células que desempeñan un papel clave en la inflamación aguda
neutrófilos
Células que pueden causar reacciones alérgicas agudas.
basófilos
Células con la función de eliminar cooperativamente complejos inmunes de la circulación sanguínea.
las células rojas de la sangre
respuesta inmune
Una serie de reacciones que ocurren cuando son estimuladas por antígenos.
El propósito de excretar o descomponer el antígeno.
característica
Identificar el yo y el no yo
especificidad
memoria
Diversidad, tolerancia, autorregulación.
Clasificación
inmunidad innata
También conocida como inmunidad innata, inmunidad no específica.
primera línea de defensa
barrera tisular
Piel y mucosas
Características
Primeros días
rápido
innato
no específico
Inmunidad adaptativa
También conocida como inmunidad adquirida, inmunidad específica.
proceso
identificar
Células presentadoras de antígenos (APC)
Reconocer, ingerir, degradar
identificar
ingerir
tragar en el estómago
degradación
descompuesto en péptidos antigénicos
Entregar
liberado después de la descomposición
Información del antígeno actual.
Para células T auxiliares y linfocitos relacionados.
activación
células T y B
El proceso de activación, proliferación y diferenciación después de recibir señales de estimulación antigénica.
estimulación directa
Estimulación post-presentación de APC
células B
Célula de plasma
Inmunidad humoral
Inmunidad humoral completa con la ayuda de fagocitos.
células T
Células efectoras (células T asesinas)
inmunidad celular
Etapa de efecto
Célula de plasma
secretar anticuerpos
células dependientes del timo
Al activar las células B
Necesita ayuda de células T auxiliares
células T
Células T auxiliares (células Th)
secretar citocinas
Células T asesinas (CTL)
Ejecutar efectos citotóxicos.
células diana
células tumorales
células infectadas por bacterias
órgano trasplantado
células de memoria
Después de la proliferación y diferenciación, una pequeña cantidad de células T y células B
No realiza directamente funciones efectoras.
Actuando
respuesta inmune nuevamente
No se requiere etapa de activación
Producir anticuerpos directamente.
respuesta inmune primaria
Características de la producción de anticuerpos.
anticuerpos de baja afinidad
Inmunidad activa artificial e inmunidad pasiva artificial
inmunidad activa artificial
Vacunación con vacuna (antígeno)
inmunidad pasiva artificial
Suero inmunológico (anticuerpos), linfocinas
como el tétanos
No hay necesidad de estimular
Inmunidad inmediata
tejidos y órganos inmunes
sistema
órgano inmunológico
Células inmunes
moléculas inmunes
órgano inmunológico
órgano inmune central
El lugar donde se producen, diferencian y maduran las células inmunes.
médula
órgano hematopoyético importante
El lugar de nacimiento de las células sanguíneas y los linfocitos (T, B)
células B
lugar maduro
Los fluidos corporales también provienen de la médula ósea.
timo
células T
lugar maduro
órganos inmunes periféricos
sitio de respuesta inmune
Lugares de identificación y activación.
recirculación de linfocitos
Punto de partida, estación intermedia y destino del regreso a casa.
órganos inmunes periféricos
sangre
órganos inmunes periféricos
Organo
ganglios linfáticos
la mayor cantidad
bazo
máximo
tejido linfoide asociado a la mucosa
amígdalas, ganglios linfáticos del intestino delgado, apéndice
Células inmunes
Clasificación
Linfocitos
células T y B
células NK
Células mononucleares-fagocíticas
Rol de soporte
fase tardía de la inmunidad humoral
etapa temprana de la inmunidad celular
células presentadoras de antígenos
Los monocitos ingresan a los tejidos.
son fagocitos
Linfocitos
células T
Función
inmunidad celular
de linfocitos totales de sangre periférica
60%-80%
marcado de superficie
CD28
Expresado en
superficie de células T
Puede interactuar con CD80 en la superficie de las células B.
Estimular la activación de las células T.
CD45RO
Antígeno CD específico de la superficie de las células T de memoria
subpoblación
Th
Función
Promover y mejorar la respuesta inmune.
Th1
Secreta IL-2, IFN-r (interferón-r), TNF-β (factor de necrosis tumoral β)
Promover la inmunidad celular.
Th2
Secreta IL-4, 5, 6, 10
Promover la inmunidad humoral.
Regula negativamente las respuestas inmunes celulares.
TCF-β
Regulación negativa de la inmunidad celular.
CTL
reconocimiento específico
Complejo de molécula de péptido antigénico endógeno-MHC de clase I
Condiciones bajo las cuales se matan las células tumorales.
Expresa factores MHC clase I
Muerte específica de células diana.
células B
Función
Inmunidad humoral
de linfocitos totales de sangre periférica
8%-15%
marcado de superficie
mIgM=Ig de cadena u
CD80
Expresado en
superficie de células B activadas
Interactúa con CD28 en la superficie de las células T.
Estimular la activación de las células T.
CD21
Moléculas de CD en la superficie de las células B maduras.
Puede unirse al virus de Epstein-Barr
células B2
Células B principales en sangre periférica.
Célula primaria que realiza inmunidad humoral.
células B1
Implicadas en la regulación inmunológica del cuerpo, las enfermedades autoinmunes y los tumores derivados de células B están estrechamente relacionados
Tipo de antígeno reconocido
polisacárido
Células asesinas naturales (células NK)
Características
no específico
No se requiere estimulación antigénica
No es necesario activar
Mata directamente las células objetivo
No restringido por moléculas MHC
El citoplasma contiene gránulos azurófilos.
marcado de superficie
CD56, CD16
CD56 CD3-CD16
Dos viejos follan directamente sin estimulación
Determinación de células diana activas.
Actividad de las células NK humanas
línea celular K562
Actividad de las células NK de ratón
línea celular YAC
Citotoxicidad mediada por células dependiente de anticuerpos.
Mediado por células: células NK
ADCC
La función asesina de las células NK también requiere la ayuda de anticuerpos
Se necesitan anticuerpos
IgG
proceso
La IgG se une al determinante antigénico correspondiente de la célula diana.
Las células NK se unen al segmento Fc de IgG.
Activar las células NK
Libera perforina, granzimas, etc. para matar las células objetivo.
apoptosis de la célula diana
Detección
Actividad de destrucción de células NK
Prueba de citotoxicidad
células inmunes auxiliares
Glosario
Linfocitos
Especialmente células T
La activación requiere la participación de no linfocitos.
Clasificación
Células mononucleares-fagocíticas
Células dendríticas
Células mononucleares-fagocíticas
fagocitos grandes
Monocitos en la sangre.
Macrófagos en los tejidos.
La superficie contiene receptores carroñeros, TcrR, TLR y receptores del complemento.
Sin receptor de reconocimiento de antígenos
Porque los macrófagos son inespecíficos.
pequeños fagocitos
neutrófilos
marcas de superficie
Células mononucleares-fagocíticas
CD14
neutrófilos
CD33
Células dendríticas
Sin capacidad fagocítica
Tiene una fuerte capacidad de presentación de antígenos.
Células presentadoras de antígenos (APC)
marcas superficiales importantes
Antígeno MHC clase II
Después de la activación de los macrófagos, altos niveles de
Los niveles de expresión son bajos en macrófagos en reposo.
Tiempo completo
Células mononucleares-fagocíticas
Células dendríticas
Células presentadoras primarias de la respuesta inmune primaria.
células B
No se requiere activación
Nuevamente las principales células presentadoras de la respuesta inmune.
Tiempo parcial
Células endoteliales
Células epiteliales
células T activadas
debe ser activado
Aislamiento y preservación de células inmunes.
separación
Aislamiento de células mononucleares.
Líquido de separación Ficoll
Método de centrifugación en gradiente de densidad única
Sólo hay una densidad, sólo una capa (capa intermedia) después de la centrifugación
Un solo núcleo también está aquí
Aislar células mononucleares
Linfocitos
núcleo simple
en capas
plaquetas, capa de plasma
Capa de células mononucleares (medio de separación Ficoll)
granulocitos, capa de glóbulos rojos
Rango de gravedad específica
células mononucleares
1.075-1.090
granulocitos multinucleados
Alrededor de 1.092
plaquetas
1.030-1.035
Aislamiento de linfocitos
Método de adhesión, método de filtración en columna de adsorción.
principio
Las células mononucleares pueden adherirse activamente al vidrio, plástico, lana de nailon, fibra de algodón y gel de dextrano.
Retire los monocitos de la suspensión.
Obtener población de linfocitos pura.
método de atracción magnética
El mononúcleo puede fagocitar partículas de hierro.
Método de separación Percoll
centrifugación en gradiente de densidad continua
en capas
células muertas, plaquetas, plasma
Monocitos (capa superior)
Linfocitos (capa inferior)
granulocitos, capa de glóbulos rojos
Aislamiento de células T y B.
Método de sedimentación en roseta E.
Las células T tienen receptores de eritrocitos de oveja (receptor E/receptor CD2)
células T
Método de sedimentación en roseta EA
Las células B tienen receptores IgG Fc
Puede unirse al segmento Fc de la inmunoglobulina IgG.
células B
Aislamiento de subconjuntos de células T.
principio
Según las características de las células correspondientes y diferentes marcadores de superficie.
Th
CD4
CTL
CD8
Método de separación y unión de placas de afinidad
Método de separación de microesferas magnéticas.
Método de separación del separador de células activado por fluorescencia.
ahorrar
Preservación a largo plazo
Criogenia con nitrógeno líquido
-196
Agente protector
dimetilsulfóxido
Ensayo de viabilidad de células aisladas.
A ver si tiene alguna funcion
Comprueba las funciones antes de guardar.
tinción con azul tripán
Incluyendo comprobar si el esperma está vivo o muerto.
azul tripán
Membrana celular intacta que es impermeable a las células vivas.
Las células vivas no se tiñen.
tinción de células muertas
azul
Detección de marcas superficiales
Método de roseta de células sensibilizadas con anticuerpos
mi guirnalda
Ea guirnalda
inmunocitoquímica
Los anticuerpos marcados con enzimas se unen a receptores específicos de las células
Porcentaje de células teñidas observadas con un microscopio ordinario.
inmunofluorescencia
Los anticuerpos marcados con fluoresceína se unen a receptores específicos de las células
Observación con microscopio de fluorescencia del porcentaje de células fluorescentes.
citometría de flujo
Pruebas funcionales de linfocitos.
Pruebas de función de células T
Prueba de proliferación de linfocitos T/transformación de linfoblastos (prueba in vitro) (prueba de transformación de linfocitos PHA)
principio
Después de que las células T sean estimuladas por mitógenos o antígenos in vitro
Aumento de la síntesis intracelular de proteínas y ácidos nucleicos.
Aumento de tamaño, aumento de la síntesis de ADN en el núcleo y ARN en el citoplasma.
Aumento del citoplasma
Aparece la cavitación
Cromatina nuclear suelta
Los nucléolos son evidentes.
volver a linfoblasto
celización madre
Transformada nuevamente en madre, para poder proliferar.
irritantes
mitógeno no específico
Fitohemaglutinina (PHA)
Concanavalina A (ConA)
Phytolacca americana (PWM)
antígeno específico
Derivado proteico purificado (PPD) de Mycobacterium tuberculosis
toxoide tetánico
Estimular la proliferación de células T.
antígeno tumoral
células alogénicas
Fitohemaglutinina (PHA)
Estimular la proliferación de células B.
Virus de Epstein Barr
Estimula simultáneamente la proliferación de células T y B.
Derivado proteico purificado (PPD) de Mycobacterium tuberculosis
Método de detección
Examen morfológico
Método de incorporación de 3H-TdR (método de radionucleidos)
Los linfocitos activados toman precursores para la síntesis de ADN.
timidina marcada con 3H
Según la cantidad de mezcla
Ensayo de citotoxicidad mediada por células T.
principio
Cuando las células T sensibilizadas vuelven a encontrar el antígeno de la célula diana correspondiente
Destrucción y lisis demostrada de células diana.
Aplicacion clinica
Evaluar el nivel inmunológico de las células del cuerpo.
En particular, medir la capacidad de los CTL en pacientes con tumores para destruir células tumorales.
Determinar el pronóstico y observar el efecto curativo.
Pruebas in vivo
principio
Una vez que el cuerpo normal ha establecido la inmunidad celular a un antígeno específico,
Hacer una prueba cutánea con el mismo antígeno.
reacción de hipersensibilidad retardada positiva
método
Prueba de tuberculina (OT/PPD)
Vacunación subcutánea
2-3 días después
enrojecimiento, hinchazón, ampollas
>20mm
Prueba de infección tuberculosa.
Si al paciente se le diagnostica tuberculosis.
PPD negativo
Demuestra una función inmune celular reducida.
Aplicacion clinica
Si tiene capacidad de respuesta inmune celular específica a un determinado antígeno.
Estado inmunológico celular
Diagnóstico de determinadas infecciones microbianas patógenas (tuberculosis, lepra)
Diagnóstico de enfermedades de inmunodeficiencia celular.
Determinar el pronóstico de la enfermedad.
Pruebas funcionales de células B.
Ensayo de proliferación de células B.
principio
Igual que el ensayo de proliferación de células T.
irritantes
Células B de ratón
Lipopolisacárido bacteriano (LPS)
células B humanas
Staphylococcus aureus y anticuerpos anti-IgM con SPA
SPA
Proteína estafilocócica A
Prueba de placa hemolítica
La capacidad de las células B para producir anticuerpos.
principio
Uso de glóbulos rojos de oveja (SRBC)
Ratones inmunizados
Quitar el bazo del ratón.
Preparación de suspensión de esplenocitos.
En su interior se encuentran las células plasmáticas.
Preparación de placas de agar que contienen SRBC.
Añadir suspensión de células de bazo a la placa.
Si se producen anticuerpos anti-SRBC, el área circundante quedará sensibilizada.
Con la participación del complemento.
Disolver SRBC
Formación de placas hemolíticas visibles a simple vista.
proceso
significación clínica
Cada placa contiene una célula formadora de anticuerpos en el centro.
Número de placas
Número de células formadoras de anticuerpos.
tamaño de la placa
¿Cuántos anticuerpos produce cada célula?
prueba de placa hemolítica inversa
Determinar el número de células productoras de anticuerpos.
Prueba de inmunomancha ligada a enzimas (ELISPOT)
MACETA
significado de manchas
solicitud
Pruebas in vitro
células B de anticuerpos específicos
Cantidad de secreción de anticuerpos
Células T secretoras de citocinas
Puede detectar células secretoras de anticuerpos.
También puede detectar la cantidad de anticuerpos secretados.
Prueba de función de células fagocíticas
Prueba de función de neutrófilos
Prueba de función de quimiotaxis
Método de permeabilidad de la membrana filtrante (método de la cámara de Boyden)
prueba de ventana cutánea
Capacidad bactericida intracelular.
Prueba de reducción de nitro azul tetrazolio (NBT)
Tasa positiva de personas normales.
5%-10%
La tasa de positividad aumentó significativamente
infección bacteriana sistémica
Fagocitosis y actividad metabólica.
Método de quimioluminiscencia
Sustancias que pueden mejorar la eficiencia luminosa.
luminol
Prueba de función de macrófagos
Prueba de eliminación de partículas de carbono
Los fagocitos pueden tragar partículas de carbono.
moléculas inmunes
Células inmunoactivas o células relacionadas.
Secretada para participar en la respuesta inmune del cuerpo o en la regulación inmune.
Sustancias proteicas y polipeptídicas.
Clasificación
inmunoglobulina
Anticuerpo
complementar
Citoquinas
moléculas de adhesión celular
antígeno de diferenciación de leucocitos humanos
inmunoglobulina
Inmunoglobulina (Ig)
Una globulina que tiene una estructura química similar a una molécula de anticuerpo.
forma de Y
Anticuerpos (Ab)
Globulina producida por células B que proliferan y se diferencian en células plasmáticas después de recibir estimulación antigénica.
Ejercer la función inmune humoral.
Anticuerpos con efectos secundarios mínimos
anticuerpos de molécula pequeña
El portador más eficaz de fármacos terapéuticos.
Anticuerpos monoclonicos
Todos los anticuerpos son inmunoglobulinas.
No todas las inmunoglobulinas son anticuerpos.
como el mieloma múltiple
Clasificación
Secretada (sIg)
Se encuentra principalmente en los fluidos corporales.
Tienen varias funciones de los anticuerpos.
Modelo (mig)
Expresado en la superficie de las células B como receptor de antígeno.
inmunoglobulinas de superficie de membrana
Estructura química
Las moléculas de Ig están compuestas por 4 cadenas peptídicas.
2 cadenas pesadas idénticas (H)
Cadena γ, α, μ, δ, ε
Diferentes cadenas pesadas, diferentes tipos de inmunoglobulinas.
2 cadenas ligeras idénticas (L)
Cadena K, L
K:L aproximadamente 2:1
Dos pesados y dos ligeros, cambio superior y constante inferior, clasificación pesada y constante, clasificación ligera y constante, antígeno de nudo variable ligero y pesado
Clasificación de inmunoglobulinas
región constante de cadena pesada
tipificación de inmunoglobulinas
región constante de cadena ligera
Antigenicidad de región constante de cadena pesada (CH)
IgG (γ)>IgA (α)>IgM (μ)>IgD (δ)>IgE (ε)
segmento fc
Región constante (región VH)
Epítopos de isotipos de inmunoglobulinas
Región constante (CH, CL)
sitio de unión al antígeno de inmunoglobulina
Variabilidad de la cadena pesada (H) y la cadena ligera (L) (región V)
Región hipervariable (HVR)
Dentro de la región variable del anticuerpo (región V)
Sitio que se une a un epítopo antigénico.
También conocida como región determinante de la complementariedad (CDR)
Hay 6 sitios que realmente se unen al antígeno.
Clasificación
IgG
Fuerza principal
el contenido más alto
El único anticuerpo que puede atravesar la placenta
Autoanticuerpos, anticuerpos hipersensibles tipo II, anticuerpos secundarios (anticuerpos secundarios) en pruebas inmunológicas
IgG1, IgG2, IgG3, IgG4
El mayor contenido de IgG1.
IgG4 no puede activar el complemento
Inmunoelectroforesis convectiva
IgG1 e IgG2
debido a la electroósmosis
Avanzar hacia el cátodo
IgG3 e IgG4
debido a la corriente
avanzar hacia la positividad
Largo período de incubación
Alta afinidad
anticuerpos primarios de la respuesta inmune secundaria
efecto
IgM
Primero de Marzo
pentámero
Gran peso molecular
macroglobulina
Los primeros anticuerpos sintetizados y secretados durante la ontogenia.
Aumento de IgM en sangre de cordón umbilical de recién nacidos
infección intrauterina
Los anticuerpos se producen por primera vez después de la estimulación con antígenos.
Los niveles séricos de IgM aumentan durante la infección.
infección reciente
Puede causar agregación de glóbulos rojos en medio salino.
Identificación del tipo de sangre (método de diapositiva)
Baja afinidad
La capacidad más fuerte para activar el complemento.
lectinas naturales
aglutinina fría
síndrome de aglutinina fría
Enfermedades autoinmunes causadas por inmunoglobulinas IgM.
IgA
Guardia de fronteras
Secretada (sIgA)
estructura dímera
Contiene una cadena J y un parche secretor.
Participar en la inmunidad mucosa local.
anticuerpo primario
Presencia de tracto gastrointestinal, secreciones bronquiales, calostro, saliva, lágrimas.
La sIgA en la leche materna mejora la barrera inmunitaria local en los bebés de 4 a 6 meses después del nacimiento
anticuerpos locales
IgE
menos contenido
Anticuerpos citotrópicos
Afinidad por mastocitos y basófilos.
Reacción de hipersensibilidad tipo I
aumentar
Reacción de hipersensibilidad tipo I
Asma bronquial, rinitis alérgica.
enfermedades no alérgicas
mieloma IgE
Infeccion parásita
Preparación de fragmentos de inmunoglobulina.
método enzimático
sensibilidad a la papaína
La IgG se escinde en 2 fragmentos Fab y un fragmento Fc.
Enzimas utilizadas para producir fragmentos Fc de inmunoglobulinas.
Pepsina
La IgG se escinde en F(ab)2 y varios fragmentos pequeños.
subtema
Ensayo de inmunoglobulina en fluidos corporales.
Determinación de IgG, IgA, IgM
Contenido g/L nivel
Método de inmunodifusión circular unidireccional.
inmunoturbidimetria
Más usado
Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas
Determinación de subclases de IgG.
sensibilidad más baja
complementar
Descripción general
Complemento (C)
Un grupo de glicoproteínas en el suero que tienen actividad similar a una enzima y son termolábiles (principalmente β-globulina)
pero no una enzima
Sintetizada por células hepáticas y macrófagos.
Los antígenos estimulan el cuerpo.
no producirá
sistema complementario
Composición
ingredientes inherentes
C1, C2, C3, C4, C5
proteína reguladora del complemento
Composición del receptor del complemento
C3
el contenido más alto
C2
El contenido más bajo
Factor D (sin C2)
El contenido más bajo
Peso molecular mínimo
Cq1
El mayor peso molecular.
Un fragmento de C1
propiedades químicas
Secar en frío
mantenlo activo
inactivación del complemento
56℃
30 minutos
Ácidos y bases fuertes
Fuerte shock
ciertos aditivos
Éter
etanol
proteasa
irradiación ultravioleta
vía de activación
C9 es N.
etapa de identificación
Requiere la participación de inmunoglobulinas.
IgM o IgG se unen al antígeno
Activar C1q y C1s
etapa de activación
C1s escinde C4 y C2
Formación de convertasa C3 (C4b2b)
La convertasa C3 escinde C3
Formas de convertasa C5 (C4bC2bC3b)
Etapa de ataque de película MAC
La convertasa C5 escinde C5
Formación del complejo C5b67.
C5b678 incrustado en la membrana celular
N C9 entrar
formar poros transmembrana
El agua externa puede entrar en las células.
causando lisis celular
El complemento se escinde en múltiples fragmentos durante la activación.
fragmentos más pequeños
a
fragmentos más grandes
b
excepción C2
fragmento más grande
C2a
fragmento más pequeño
C2b
El único pequeño fragmento en el camino clásico.
efecto
Los anticuerpos auxiliares ejercen un efecto citolítico.
Participar en el efecto de defensa y autoestabilidad del organismo.
Causa reacciones inmunopatológicas.
C3a y C5a
Actúa sobre la membrana celular de los núcleos de los mastocitos y los basófilos.
Desnuclea las células para liberar histamina y leucotrienos.
Cambios en la historia clínica por reacciones anafilactoides
anafilatoxinas
células raji
Hay una gran cantidad de receptores C3b, C1q y C3d en la superficie.
sin sonrisa
Utiliza estos receptores para unirse a complejos inmunes circulantes que se unen al complemento.
Luego agregue IgG antihumana marcada con radionúclidos
Complejos inmunes circulantes detectables
Ensayo de actividad del complemento total
Prueba de hemólisis del complemento 50% (determinación de CH50)
principio
Los anticuerpos SRBC (glóbulos rojos de oveja) se unen a los antígenos de superficie SRBC
Activar el complemento (vía clásica)
Volumen sérico mínimo para hemólisis del 50%
Refleja la actividad total del complemento.
Más del 100% de hemólisis
Más sensible y más fácil de observar.
Dependencia de la reacción hemolítica de la dosis del complemento.
Curva especial en forma de S
La hemolisina se utiliza principalmente
2 unidades (2U)
unidad
unidades/ml
Influencia
Disminución de la actividad hemolítica.
PH
Tampones y fuerza iónica.
aumentar la altura
ion
Amortiguador de iones de calcio y magnesio.
exceso
Inhibir la actividad hemolítica
significación clínica
aumentar la altura
tumor maligno
C3 y C4 también aumentaron
prueba de fijación del complemento
principio
Los complejos antígeno-anticuerpo se unen al complemento.
El antígeno o anticuerpo libre no puede unirse al complemento.
tampón de dilución
Una cantidad adecuada de cloruro de sodio.
Pequeñas cantidades de iones de calcio y magnesio.
Tener un cierto valor de pH
Detección
Antígeno o anticuerpo
sistema indicador
hemolisina
Anticuerpos que lisan los glóbulos rojos.
Glóbulos rojos de oveja
Sistema antígeno-anticuerpo
efecto
Indica si el complemento está ligado
Detectar la presencia del antígeno o anticuerpo a probar
Clasificación
sistema de reacción
sistema complementario
es un reactivo
Uso general
Suero fresco de cuy
No siendo probado
sistema indicador
hemolisina
glóbulos rojos de oveja
proceso
Añadir reactivo 1
Antígeno conocido/anticuerpo conocido
Añadir suero (ver anticuerpos/ver antígenos)
Añadir reactivo 2
agregar complemento
Añadir reactivo 3
Únase al sistema de instrucción
Si hay anticuerpos en el suero, entonces el complemento ya se ha combinado en el primer paso y el reactivo 3 ya no se puede combinar.
No hemolítico
No hemolítico
Positivo
Presencia de antígeno/anticuerpo a analizar
unidad de dosificación
Unidad de servicios públicos
hemólisis completa mínima
Dosis
Antígeno, anticuerpo, hemolisina, glóbulos rojos de oveja.
0,1 ml cada uno
complementar
0,2 ml
0,6 ml totales
Dosis de complemento de prueba formal
fórmula
cantidad mínima de hemólisis completa
Dilución 1:60
Y
Y*2:60=0,2:X
X: factor de dilución
2: 2 unidades de complemento
0.2: Dosis del complemento
significación clínica
reducir
Mayor consumo
AR (reumatoide), LES (lupus eritematoso sistémico), hemólisis autoinmune activa (hipersensibilidad tipo II), rechazo de trasplantes
Infecciones bacterianas
Especialmente infecciones de células Gram negativas.
microorganismos más sensibles
La disminución de los niveles séricos del complemento a menudo resulta de la activación de la vía alternativa del complemento.
Estimulación de lipopolisacáridos (LPS)
Síntesis insuficiente
enfermedad hepática grave
Desnutrición
pérdida masiva
Quemaduras extensas
Sangrado abundante
síndrome nefrótico
significación clínica
Enfermedades genéticas por deficiencia del complemento.
Defecto de la molécula inhibidora C1
No es falta de C1
angioedema hereditario
defecto C3
infección severa
Citoquinas
Células inmunes activadas y ciertas células estromales.
sustancias activas secretadas
naturaleza química
Proteína o péptido de molécula pequeña
Principalmente glicoproteínas
Principalmente proteínas de bajo peso molecular.
Existen principalmente en forma única.
No restringido por MHC
funciones biológicas
Mediar y regular las respuestas inmunes y las respuestas inflamatorias.
Regular una variedad de funciones fisiológicas celulares.
Las células B por sí solas no pueden estimularse para que produzcan anticuerpos.
Activación y proliferación de células B.
Requiere señales duales, reconocimiento dual y citocinas.
Detección
método más utilizado
Ensayo inmunológico
ELISA
Metodo preferido
Medición únicamente de inmunorreactividad
No probado para actividad inmune
citometría de flujo
Prueba de inmunomancha ligada a enzimas (ELISAPOT)
Métodos que no pueden medir moléculas precursoras de citocinas.
Ensayo de actividad biológica.
incluir
Interleucina (IL)
IL-2
producción de células T
Promover y mantener el cultivo de células T a largo plazo.
factor de crecimiento de células T
rechazo de trasplante
Después de la activación, se secreta IL-2 para promover que las células T efectoras (CTL) ingresen al injerto y promover que las células B produzcan anticuerpos.
En hipersensibilidad retardada (DTH)
no solo causa la proliferación de células T activadas por antígenos
También puede provocar que las células T "espectadoras" proliferen
Puede activar las células NK
Detección
Ensayo de proliferación celular promovida.
reducir
hepatitis B crónica
hepatitis B crónica
Células mononucleares estimuladas con LPS.
La capacidad de secretar IL-1 e IL-2 es significativamente menor que la de las personas normales.
IL-4
producción de células Th2
Promover el cambio de clase de inmunoglobulina
Células mononucleares de sangre periférica de pacientes con tuberculosis estimuladas con antígenos micobacterianos
obviamente aumentar
Iniciar células B inactivas para entrar en la fase de síntesis de ADN.
Reacción de hipersensibilidad tipo I
Estimula la proliferación y diferenciación de células B específicas en células plasmáticas.
Producir IgE característica
Aumentar
tuberculosis pulmonar activa
IL-3, IL-5
Reacción de hipersensibilidad tipo I
Después de unirse a los receptores de superficie de los eosinófilos
estimular su activación
Libera gránulos eosinófilos y sustancias bioactivas.
IL-5
Promover la proliferación, diferenciación y quimiotaxis de eosinófilos.
IL-6
Mieloma múltiple, pacientes con mieloma.
Factores importantes que aumentan el número de osteoclastos.
Factores clave que promueven la proliferación y diferenciación de las células plasmáticas.
Más comúnmente utilizado para estimular la proliferación de células de hibridoma de células B.
El rechazo crónico ocurre después del trasplante de órganos.
Niveles de citocinas en pacientes.
aumentado significativamente
IL-6
IL-6, IL-1
Estimula a los hepatocitos para que secreten proteínas de fase aguda.
IL-8
Efecto quimiotáctico sobre los neutrófilos.
IL-10
regulador inmunológico negativo
Puede inhibir la síntesis de IL-2 e IL-1.
IL-18
Tiene actividad quimiotáctica
método
Ensayo de actividad quimiotáctica.
Interferón (IFN)
interferón tipo I
interferón alfa
producción de leucocitos humanos
interferón beta
Producido por fibroblastos humanos.
Fuerte efecto antiviral
interferón tipo II
rinterferón
producción de células T
producción de células Th1
efecto
Efecto inmunomodulador
más fuerte
efecto antiviral
Inhibir la transformación de células Th0 en células Th2.
Porque esto es producido por Th1, por supuesto va dirigido a mi madre.
Es decir, inhibir la activación y proliferación de las células Th2.
Puede activar las células NK
El IFN-α y el IFN-r actúan sobre diferentes receptores.
Producido después de la estimulación por antígeno.
Método de detección
Ensayo de actividad antiviral
factores de crecimiento
Factor de crecimiento transformante (TGF)
TCF-β
Regulación negativa de la inmunidad celular.
familia de quimiocinas
factor de necrosis tumoral (TNF)
TNF-α
caquexia
Principales citocinas que causan caquexia.
estimular las células diana para que produzcan
IL-1, IL-6
Puede activar las células NK
Detección
Tiene actividad citotóxica.
Ensayos de actividad citotóxica disponibles.
TNF-β
por células T
producción de células Th1
Factor estimulante de colonias (LCR)
Factores que activan la función de las células NK
IL-2, IFN-r, TNF-α
Factor de adhesión celular (CAM)
Recibido de la unión y adhesión mutua entre células o entre células y matriz extracelular.
Péptidos o glicoproteínas de molécula pequeña
forma de funcionamiento
Unión de ligandos del receptor.
efecto
Participa en la respuesta inmune, inflamación, coagulación, cicatrización de heridas y metástasis tumorales, etc.
Base molecular
Clasificación
Familia dependiente de iones calcio/familia mucocadina
familia de integrinas
Superfamilia de inmunoglobulinas
familia similar a la mucina
familia selectina
No incluye familia de factores inflamatorios.
Principales métodos de medición.
método ELISA
Características
Actuación
Pleiotropía
superposición
Efecto de resistencia
sinergia
Necesidad de unirse específicamente a receptores de alta afinidad en las células diana
ejercer efectos biológicos
igual que la insulina
Tiene efectos biológicos extremadamente fuertes.
Sólo se necesitan trazas de citoquinas
Puede actuar de forma paracrina, autocrina o endocrina.
igual que las hormonas
efectos clínicos
Evaluación del estado inmunológico del cuerpo y la función inmune celular.
Más usado
Diagnóstico asistido de enfermedades específicas.
específico
solo un auxiliar
Detección de efectos del tratamiento de enfermedades y orientación sobre el uso de medicamentos.
la prevención de enfermedades
tratamiento de enfermedades
Ahora muchas citocinas se han convertido en medicamentos.
otro
Acerca de las citocinas producidas por las células T
Tipos de anticuerpos que pueden afectar a las células B
Reacción antígeno-anticuerpo
principio
Complementariedad estructural y afinidad de determinantes antigénicos (epítopo) y regiones hipervariables de anticuerpos.
Capacidad de unión a antígeno
unión no covalente
No forma enlaces covalentes.
atracción electrostática
las fuerzas de van der Waals
más débil
fuerza de enlace de hidrógeno
fuerza hidrófoba
más fuerte
Esto se debe a que la membrana de hidratación del antígeno y del anticuerpo debe apartarse para exponer el sitio de unión.
entonces es el mas fuerte
Afinidad
La fuerza de unión entre un sitio de unión a antígeno en una molécula de anticuerpo y un epítopo de antígeno que responde
Dependiendo de
grado de complementariedad de la configuración espacial
refleja
Relación complementaria antígeno-anticuerpo
expresar
Constante de equilibrio K
Cuanto mayor sea el valor de K, más fuerte será la afinidad.
Cuanto más fuerte sea la unión al antígeno.
Afinidad
La fuerza de unión adaptativa entre un sitio de unión a antígeno en una molécula de anticuerpo y el determinante antigénico correspondiente.
La fuerza de unión inherente entre antígeno y anticuerpo.
refleja
La fuerza de unión entre antígeno y anticuerpo.
Características
especificidad
Reversibilidad
Proporcionalidad
escenario
especificidad
Complementariedad entre determinantes antigénicos y regiones hipervariables de anticuerpos.
reactividad cruzada
dos moléculas de antígeno diferentes
Epítopos antigénicos con estructuras parcialmente idénticas o similares.
Pueden tener reacciones cruzadas con los antisueros correspondientes de cada uno.
reacción waifei
Las bacterias mutans y Klebsiella tienen el mismo epítopo antigénico.
Reemplazo de Chrysotitis sp. por mutans.
Diagnóstico de tifus (critsiosis)
Me voy del trabajo afuera, regresa inmediatamente.
Exterior: Epífisis Lado: Metamorfosis Clase: Mácula Inmediatamente: Rickettsia
Reversibilidad
La disociación puede ocurrir bajo ciertas condiciones.
cromatografía de afinidad
Cambiar el pH y la fuerza iónica de la solución promueve la disociación del complejo antígeno-anticuerpo.
purificando así el antígeno o anticuerpo
Permanece biológicamente activo después de la disociación.
Proporcionalidad
La cantidad de conjugados formados está relacionada con la concentración de los reactivos.
Ratio óptimo (punto de equivalencia)
La relación de concentración del antígeno al anticuerpo que produce la reacción visible más rápida.
Zona de equivalencia
El rango apropiado para la proporción de moléculas de antígeno-anticuerpo.
La reacción de precipitación máxima también ocurre en
fenómeno de la banda
Exceso de antígeno y anticuerpo sin precipitación.
correa delantera
Sobredosis de anticuerpos
correa trasera
Exceso de antígeno
Llano por delante y por detrás
Los anticuerpos son relativamente planos.
escenario
El primer escenario
Unión específica de antígenos y anticuerpos.
Rápido, invisible
segundos a minutos
Segunda etapa
Aglutinación, precipitación, lisis celular.
Respuesta lenta, visible
minutos a horas
Factores de influencia
electrólito
Hacer que el antígeno y el anticuerpo pierdan parte de su carga
propenso a la aglutinación o precipitación
0,85% cloruro de sodio
acelerar la formación de complejos inmunes
de lento a rápido
SCN-, CLO4-, NO3-, SO4-, H2PO4-
El más rápido es
CL-
pH
Las reacciones antígeno-anticuerpo deben llevarse a cabo en un ambiente de pH adecuado.
pH óptimo6-9
Porque el pH humano es 7,35-7,45
temperatura
aumento de la temperatura
Puede acelerar el movimiento molecular
Mayores posibilidades de colisión antígeno-anticuerpo
Aceleración de reacción
Temperatura: 37 ℃
Preparación de inmunógenos y antisueros.
Preparación de inmunógeno
inmunógeno
Puede inducir al cuerpo a producir anticuerpos o linfocitos sensibilizados.
Sustancias que provocan reacciones específicas.
característica
Inmunogenicidad
se produce una respuesta inmune
La capacidad de inducir el desarrollo de anticuerpos o linfocitos sensibilizados.
Inmunoreactividad (antigenicidad)
Características de la capacidad de unión específica.
Clasificación
antígeno completo
inmunorreactivo
inmunogénico
haptear
inmunorreactivo
No inmunogénico
Sin respuesta inmune
No produce anticuerpos ni sensibiliza los linfocitos.
Péptidos, hormonas esteroides, nucleósidos, ciertos fármacos (penicilina)
No inmunogénico
Solo combinado con un vehículo (la albúmina sérica bovina se usa más comúnmente)
ser inmunogénico
antígeno dependiente del timo
No se puede confiar en I-trabajador
preparación
Fresco o almacenado a -40 ℃
antígeno particulado
grande
Antígenos celulares, antígenos bacterianos, antígenos de parásitos.
inmunización intravenosa
antígeno soluble
Molécula pequeña
Proteínas, glicoproteínas, lipoproteínas, enzimas, complemento, toxinas bacterianas, fragmentos de inmunoglobulinas, ácidos nucleicos.
extracción bruta
Adquisición de células individuales.
maceración mecánica
Tratamiento enzimático
Método de alteración celular
método repetido de congelación y descongelación
Interrupción ultrasónica
Método de autólisis
Tratamiento enzimático
Método de tratamiento con surfactante.
Extracción y purificación
Método de salazón
Método de sal del sulfato de amonio
Método de extracción con sulfato de ácido octanoico de amonio.
Método de sal del sulfato de sodio
Sal neutra (33-50% sulfato de amonio saturado)
Puede destruir la membrana de hidratación.
neutralizar la carga
agregan y precipitan proteínas
el mas clasico
más duro
Tecnología de separación y purificación de proteínas.
No afecta la actividad
Método de precipitación de polímeros (CIC)
Detección de complejos inmunes circulantes
Método de precipitación con PEG
No puede reflejar la situación de los complejos inmunes circulantes de moléculas pequeñas.
Determinación de complejos inmunes inespecíficos de antígeno.
Características
Simple
Poca especificidad
susceptible a los efectos de la temperatura
Polietilenglicol (PEG)
peso molecular
6000
Cuanto mayor sea el peso molecular de la proteína
Cuanto menor sea la concentración de PEG necesaria para precipitar
3%-4%PEG
Complejos inmunes precipitables
>5%
Desaparece la característica de seleccionar CIC precipitado.
8%-12%
Precipita IgG
La tecnología de participación complementaria detecta CIC
método
Método de fase sólida C1q
Método Anticuerpo C3-CIC-ELISA
No se pueden detectar complejos inmunes circulantes formados por anticuerpos de clase IgA
Porque la IgA no puede unirse al complemento.
glóbulos rojos aldehídos
Características
Capacidad para soportar el calentamiento a 60°C.
Se puede congelar y descongelar repetidamente y no se rompe fácilmente.
La reacción de coagulación de la sangre es más fuerte que la de los glóbulos rojos frescos.
Largo tiempo de almacenamiento
Se pueden purificar varios virus simultáneamente
Fuerte aplicabilidad a los virus.
adyuvante inmunológico
Ayuda a generar respuesta inmune.
Inyectado en el cuerpo antes o al mismo tiempo que el antígeno.
Puede ser inespecífico
Mejorar la respuesta inmune
Cambiar el tipo de respuesta inmune.
tipo
inmunogénico
Citocinas, lipopolisacáridos, Bacillus pertussis, vacuna BCG
células y bacterias
No inmunogénico
Hidróxido de aluminio, parafina líquida, lanolina, alumbre.
Coadyuvantes para la inmunización de animales.
adyuvante de freund
adyuvante completo de freund
Parafina líquida, lanolina, vacuna BCG
Una vacuna BCG más
Adyuvante incompleto de Freund
Parafina líquida, lanolina.
Mecanismo
Cambiar las propiedades físicas del antígeno.
Mejorar la inmunogenicidad
Retrasar la degradación y eliminación del antígeno.
Estimula eficazmente el sistema inmunológico.
Estimula el sistema celular monocito-fagocítico.
Mejorar su capacidad para procesar y presentar antígenos.
Estimular la proliferación y diferenciación de linfocitos.
Aumentar el título de anticuerpos de la respuesta inmune del cuerpo.
Cambiar tipo de anticuerpo
Producir más IgG
Inducción de reacciones de hipersensibilidad de tipo retardado.
Tipo IV
No se puede cambiar la especificidad del antígeno
Si se cambia la especificidad, esta vacuna ya no será la misma.
Preparación de antisuero (preparación de anticuerpos)
antisuero: suero que contiene anticuerpos
Múltiples células B en el cuerpo se activan y producen anticuerpos contra un determinado antígeno.
anticuerpo policlonal
Cada célula B produce un anticuerpo.
Múltiples células B son anticuerpos policlonales.
tipo
Tipo R
Conejos y otros animales pequeños.
Fuerte afinidad y difícil de disociar.
Adecuado para una amplia gama
para reactivos de diagnóstico
tipo H
Caballos y otros animales grandes.
Afinidad débil, fácil de disociar.
Adecuado para rango estrecho
para inmunoterapia
Vacuna contra el tétanos
elegir
programa
tiempo
1ra y 2da vez
10-20 días
3ra vez y después
7-10 días
Extracción de sangre después de la vacunación.
5-7 días
5.7.10.20
Sitio de recolección de sangre
Recolección de sangre de la arteria carótida
Animales grandes y medianos.
Extracción de ojos o corte de cola
ratón
Purificación de antisuero
Eliminación de adsorbatos de heteroanticuerpos.
Solución de antígeno sin antígeno específico.
cromatografía de afinidad
Afinidad específica (especificidad)
Purificar anticuerpos, enzimas y proteínas receptoras.
mejor, más efectivo
Como extraer IgG específica de alta pureza
unión por afinidad Lo suficientemente dedicado
filtración en gel
Separar las proteínas según su peso molecular.
Las moléculas grandes pasan primero
gel a través del agujero mira el tamaño
Método de salazón
El más clásico y rudo.
No afecta la actividad proteica.
Método de extracción de ácido caprílico.
Salar la extracción de crudo muy clasico
Cromatografía de intercambio de iones
Según la carga que lleva la proteína.
Los iones se cargan de manera diferente.
cromatografía de afinidad
proceso
A medida que el antisuero pasa a través de la columna
La afinidad específica del portador de fase sólida por la sustancia separada.
La IgG es absorbida por la columna de cromatografía.
Luego cambie la fase móvil para hacer desaparecer la adsorción específica de la sustancia objetivo.
IgG se disocia de la columna
para lograr el propósito de la purificación
filtración en gel
Cromatografía en gel/filtración por tamiz molecular
Según el peso molecular de las proteínas.
proteína grande
Directamente a través de los espacios entre geles.
lavado primero
pequeña proteína
entrará en el gel
fue eluido más tarde
Método de salazón
Método de sal del sulfato de amonio
Método de extracción con sulfato de ácido octanoico de amonio.
Método de sal del sulfato de sodio
Sal neutra (33-50% sulfato de amonio saturado)
Puede destruir la membrana de hidratación.
neutralizar la carga
agregan y precipitan proteínas
el mas clasico
más duro
Tecnología de separación y purificación de proteínas.
No afecta la actividad
Cromatografía de intercambio de iones
Diferentes cargos
cargado positivamente
resina de intercambio aniónico
Porque lo que quiero intercambiar es anión.
Cargado negativamente
Resina de intercambio catiónico
Porque lo que quiero intercambiar son cationes.
Identificación y conservación de antisueros.
identificación
Especificidad de anticuerpos
inmunodifusión bidireccional
Determinación del título de anticuerpos.
Valoración en tablero de ajedrez (método de valoración al cuadrado)
inmunodifusión bidireccional
Concentración de trabajo óptima
criterios de juicio
Antígeno y anticuerpo
Fuerte positivo
dilución más alta
concentración más baja
ahorrar
almacenamiento a corto plazo
2-8℃
Mantener por 5 años
Métodos comunes
Evite la congelación y descongelación repetidas
criopreservación
Mantener durante 5-10 años
secado al vacío
Anticuerpos monoclonicos
Principios básicos de la tecnología de hibridomas.
Fabricación de anticuerpos monoclonales
Agente protector
dimetilsulfóxido
Anticuerpos monoclonicos
Células B individuales aisladas
Una colonia de clones formada después de la proliferación.
epítopo único
Misma estructura
Anticuerpos funcionalmente homogéneos
Diluir las células fusionadas.
cada cultura bien
De hecho
0-número de celdas
La teoría es
1 celda
Moléculas antigénicas producidas por células de hibridoma.
un único determinante antigénico
de anticuerpos
especificidad
Dependiendo de
Detección de células clonales.
Cultivo clonal de células de hibridoma positivas.
método de dilución limitante
Más usado
microscopía
Intuitivo y confiable
Largo tiempo de funcionamiento y fácil de contaminar.
clasificador de células activadas por fluorescencia
Alta eficiencia y costosa.
método de placa de agar blando
Difícil de dominar
Fundamental
esplenocitos
Células B sensibilizadas
Función de secreción de anticuerpos.
células de mieloma
no secretor
No produce inmunoglobulinas.
Se puede dividir infinitamente y tiene inmortalidad.
Prevenir la devolución del alquiler
8-azaguanina
Medicamento que puede reproducir líneas celulares de mieloma que carecen de hipoxantina-guanina fosforribosa convertasa (HGPRT)
ahorrar
-196 ℃ nitrógeno líquido
agente de fusión celular
Polietilenglicol (PEG)
SOMBRERO mediano
Hipoxantina (H), aminopterina (A), timidina (T)
Aminopterina (A)
Antagonista del ácido fólico que bloquea la vía principal de síntesis de ADN en las células.
Muerte celular no fusionada
Supervivencia de las células del hibridoma
tipo
Tecnología de hibridoma de linfocitos B
Preparar anticuerpos monoclonales.
Tecnología de hibridoma de linfocitos T
Preparación de varias linfocinas.
preparación
Método de inducción in vivo.
Tome ratones BALB/c
Inyección intraperitoneal de 0,5 ml de parafina líquida seguida de fitano
inductor
inducir ascitis
1 semana después
Inoculación intraperitoneal de células de hibridoma.
Proliferan en la cavidad abdominal de ratones.
Producción y secreción de anticuerpos monoclonales.
10-14 días después de la vacunación
Aspirar ascitis
células peritoneales
células alimentadoras
Obtener grandes cantidades de anticuerpos monoclonales
característica
Altamente específico
Sólo se une al epítopo correspondiente.
Apuntar solo a un epítopo
alto grado de uniformidad
Repetibilidad
reacción de aglutinación débil
No precipita
Después de la precipitación, no hay forma de realizar inmunoturbidimetría.
Altamente sensible al medio ambiente.
Método de purificación
Método de salazón
Método de extracción de ácido caprílico.
filtración en gel
Cromatografía de intercambio de iones
cromatografía de afinidad
El mas efectivo
Igual que la purificación del antisuero.
ahorrar
secado al vacío
Ingeniería genética
principio
Tecnología de ingeniería de proteínas y ADN recombinante.
Modificar y ensamblar genes codificadores de anticuerpos según las diferentes necesidades.
Importar celdas receptoras apropiadas
anticuerpos reexpresados
ventaja
Reducir o incluso eliminar el rechazo del cuerpo a los anticuerpos.
anticuerpos humanizados
Conserva la afinidad y especificidad del anticuerpo original.
Reducir la heterogeneidad de los anticuerpos.
Propicio para la aplicación en el cuerpo humano.
tipo
anticuerpos quiméricos
Gen de región variable funcional degene aprobado por Ig humana
Anticuerpos quiméricos ratón-humano
Características
Reducir la heterogeneidad
Conserva la especificidad y afinidad del anticuerpo original.
Reducir el rechazo
anticuerpo modificado
Determinantes de complementariedad (CDR) en regiones variables de anticuerpos humanos (regiones hipervariables)
Cambiar a la secuencia fuente del mouse
Características
Tiene la especificidad de los anticuerpos monoclonales derivados de ratón.
Mantener la avidez de los anticuerpos.
anticuerpos humanos
Anticuerpos completamente humanos
La forma más ideal de anticuerpos terapéuticos.
Anticuerpos biespecíficos/anticuerpos bifuncionales
Dos sitios de unión a antígeno tienen diferentes especificidades
combina dos moléculas de antígeno diferentes
Tecnología de biblioteca combinatoria de anticuerpos
Regiones variables de cadena ligera y pesada.
combinación aleatoria
Producir una nueva tecnología de método de emparejamiento de cadenas ligeras y pesadas
reacción de aglutinación
Descripción general
antígeno particulado
Bacterias, glóbulos rojos.
o superficie cubierta con antígeno o anticuerpo soluble
materia particular
El antígeno soluble debe cubrir las partículas.
De lo contrario invisible
Se une al anticuerpo o antígeno correspondiente.
coágulos visibles
Clasificación
reacción de aglutinación directa
antígeno particulado
reacción de aglutinación indirecta
antígeno soluble
Necesita ayuda del operador
Características
Cualitativo
Semicuantitativo
Después de la dilución
Utilice el factor de dilución más alto como potencia o título.
Cómodo y sencillo
No se requiere equipo especial
dos etapas
unión específica de antígeno y anticuerpo
Se produce una aglomeración visible de partículas.
Influencia
Promover la aglutinación
Aumentar electrolitos o proteínas.
Aumentar la viscosidad de la solución de prueba.
tratamiento con cistinasa
Tratamiento con neuraminidasa
reacción de aglutinación directa
antígeno particulado
aglutinógeno
Antígeno (partículas)
lectina
Anticuerpo
método
método de diapositiva
Anticuerpos conocidos
antígeno de prueba
En la identificación del tipo de sangre, la sangre es el antígeno, por lo que se utilizan anticuerpos conocidos.
Puede detectar tanto antígenos como anticuerpos.
solicitud
Identificación de cepas
Puede detectar ambos antígenos.
También se pueden probar anticuerpos
tipificación serológica
Identificación del grupo sanguíneo ABO.
método del tubo de ensayo
Semicuantitativo
antígeno conocido
Prueba de anticuerpos
Prueba Waifei, coincidencia cruzada, prueba Feida
Consejo: los diplomáticos están tan gordos que sangran.
prueba de waifei
Usando el mismo epítopo de Proteobacteria y Klebsiella
prueba de tifus
prueba de feida
Prueba de aglutinación tifoidea
tan gorda, tan triste
Determinar anticuerpos
prueba de aglutinación heterófila
Virus de Epstein Barr
Aparecen anticuerpos IgM
Puede aglutinar de forma no específica glóbulos rojos de oveja y glóbulos rojos de caballo.
anticuerpo heterófilo
receptores de superficie
receptor C3d
Diagnóstico de mononucleosis infecciosa
prueba de aglutinación indirecta
Antígeno o anticuerpo soluble
No se puede detectar
antígeno AFP
prueba de aglutinación indirecta directa
antígeno conocido
Prueba de anticuerpos
La aglutinación es positiva.
Adelante, primero hay un antígeno, por lo que es un antígeno conocido.
Portador sensibilizador de antígenos
prueba de aglutinación indirecta inversa
Anticuerpos conocidos
antígeno de prueba
La aglutinación es positiva.
Portador sensibilizador de anticuerpos
solicitud
diagnóstico de embarazo de látex
Lema: Hacer las cosas bien y hacer las cosas bien
Los anticuerpos son relativamente planos.
Diferencia: portador sensibilizador de antígeno o anticuerpo
prueba de aglutinación por inhibición indirecta directa
Sucesivamente
Anticuerpos conocidos
antígeno de prueba
La aglutinación es negativa.
La interpretación de los resultados también es al revés.
Sin embargo, se sabe que el anticuerpo no sensibiliza al portador.
Un agente alergénico más 2
proceso
solicitud
Prueba de Ascoli para detectar ántrax
prueba de aglutinación por inhibición indirecta inversa
Sucesivamente
antígeno conocido
Prueba de anticuerpos
La aglutinación es negativa.
La interpretación de los resultados también es al revés.
Pero el antígeno conocido no es un portador sensibilizante.
Un agente alergénico más 2
prueba de aglutinación sinérgica
Proteína A (SPA) de Staphylococcus aureus como portador
Unión no específica al segmento Fc de IgG (portador de partículas sensibilizadas)
Antígeno de prueba (desconocido)
para antígenos solubles
Detección directa de virus bacterianos.
prueba de hemaglutinación indirecta
transportador
las células rojas de la sangre
Comúnmente utilizado
Ovejas, conejos, gallinas.
Glóbulos rojos humanos tipo O
Porque no hay antígeno en la superficie tipo O
Antígeno o anticuerpo de recubrimiento sobre glóbulos rojos.
vector de sensibilización de forma
Los glóbulos rojos simples no son portadores sensibilizantes.
Ver si los glóbulos rojos se aglutinan pasivamente entre sí
resultado
Positivo
aglutinación
alrededor del fondo del agujero
Negativo
Fondo del pozo de sedimentación
un pequeño punto
Como la prueba TPPA para sífilis
prueba de aglutinación de látex
prueba de aglutinación indirecta
partículas de látex
proteína absorbible
principio
antígeno adsorbido
Detectar anticuerpos
antígeno
IgG desnaturalizada
Factor reumatoide (FR)
También conocido como factor reumatoide.
Hemolisina "O"
Antihemolisina "O" (ASO)
vector utilizado
látex de poliestireno
diámetro
0.8um
Características
método del tubo de ensayo
método de diapositiva
Firmeza de unión
Diferencia
Menos sensible que las pruebas de coagulación.
Prueba de aglutinación de gelatina
prueba de aglutinación indirecta
Antígeno adsorbido en gelatina rosa.
Detectar anticuerpos
Virus comprobables
Prueba de antiglobulina (prueba de Coombs)
prueba de coombs
Detección de hemólisis autoinmune
Métodos para detectar anticuerpos incompletos contra los glóbulos rojos.
Clasificación de anticuerpos
anticuerpo completo
IgM
porque es un pentamero
Puede hacer que los glóbulos rojos se peguen y luego se entrecrucen.
visible a simple vista
anticuerpos incompletos
Características
Puede unirse a antígenos (sensibilizar)
No debe ocurrir ninguna reacción de aglutinación visible.
un fragmento de un anticuerpo IgG
Los anticuerpos inmunes son en su mayoría anticuerpos incompletos.
tipo
prueba directa de antiglobulina
Determinación del límite superficial
Tiene valor diagnóstico para la enfermedad hemolítica Rh neonatal.
Porque esto es para detectar si las células están sensibilizadas.
prueba de antiglobulina indirecta
determinar gratis
Detección de anticuerpos maternos Rh(D) (anticuerpos anti-D)
solicitud
prueba de compatibilidad de sangre
anticuerpo anti-D
Diagnóstico de la enfermedad anémica hemolítica neonatal
Detección de anticuerpos incompletos contra bacterias.
Prueba de condensación en frío
síndrome de aglutinina fría
Detección de hemólisis autoinmune
Causada por IgM/macroglobulina/aglutinina fría
dividido en
Tipo de planta única
Híbrido
proceso
a temperaturas más bajas
Anticuerpos y aglutinación autóloga de glóbulos rojos.
Síntomas de cianosis de manos y pies.
La temperatura sube a 20-25 ℃
Se activa el complemento y se produce hemólisis.
La temperatura aumenta 37 ℃
Separación completamente reversible
Los síntomas desaparecen
Prueba de condensación en frío
in vitro
Temperatura óptima 0-4 ℃
Disociar a 37°C
Juicio de resultados
Negativo
Título de aglutininas frías <1:32
Positivo
Título de aglutininas frías > 1:64
diagnóstico
neumonía atípica primaria
reacción de precipitación
complejos inmunes circulantes
temperatura óptima de precipitación
4 ℃
reacción de precipitación en líquido
inmunoturbidimetria
definición
Buffer
Solución de fosfato
Agente que aumenta la turbidez
Polietilenglicol (PEG)
Puede formar rápidamente partículas de complejos inmunes (CI).
En caso de ligero exceso de anticuerpos e inmovilización.
La IC es proporcional a la cantidad de antígeno a medir.
principio
Instrumentos de medición ópticos combinados con sistemas de análisis automatizados.
Clasificación de inmunoturbidez
inmunoturbidimetria
Luz transmitida
Ninguna luz llega al complejo (IC)
La luz que incide en el complejo (IC) es absorbida.
Valor de absorbancia (cantidad de luz absorbida) y cantidad de IC
Correlacion positiva
Cuanto más IC, mayor es la absorbancia
inmunoturbidimetria
Luz dispersa
Luz que se refracta después de chocar con el complejo (IC)
Cuando el diámetro de la partícula es mucho menor que la longitud de onda de la luz incidente.
La distribución de la luz dispersa es relativamente uniforme.
Conviértete en un dispersor de Rayleigh
Detectar intensidad de luz dispersa
Correlacion positiva
Cuantos más circuitos integrados, más fuerte será la luz dispersa
Clasificación
Turbidimetría de dispersión de punto final
Una vez que el antígeno-anticuerpo alcanza el equilibrio.
Determinar la cantidad de complejo.
turbidimetría de dispersión de velocidad
Ensayo de inmunoglobulina
más sensible
El enfoque más apropiado
Para la determinación de la actividad enzimática
Más preciso
Método de determinación cinética
solicitud
Aparece la segunda señal pico.
La primera señal máxima es generada por todos los antígenos que se van a analizar.
No aparece una segunda señal de pico
La cantidad de antígeno probado es demasiado alta
premisa
Sobredosis de anticuerpos
Sistema de detección de sobredosis de anticuerpos.
Desarrollan sistema de detección para asegurar el exceso de anticuerpos
Prevenir el efecto gancho
Prevenir la sobredosis de antígenos (fenómeno afterzone)
Límites umbral para el exceso de antígeno
Factores de influencia
Calidad de anticuerpos
Fuerte especificidad, alta potencia y fuerte afinidad.
Utilice anticuerpos tipo R
reactivo de detección
Aplicacion clinica
Probar el contenido de Ig
método más utilizado
Prueba de apolipoproteína sérica
método más utilizado
Detectar inmunoglobulinas
IgG, IgA, IgM
Alto contenido
Detección de subclases de inmunoglobulinas.
Complemento C3, C4
Proteína traza urinaria
concentración de fármaco terapéutico
Prueba de sedimentación en gel
Prueba de difusión de agar unidireccional
Se puede hacer manualmente
Sólo se puede realizar la prueba de antígeno.
principio
Mezcle una cantidad cuantitativa de anticuerpo en el gel de agar.
placa de agar
Taladre agujeros en el tablero de plástico.
Inyectar suero (antígeno) en el pozo.
método de placa
En gel de agar al 0,9%
37 ℃, expansión libre
difusión en anillo
método del tubo de ensayo
Solución de agarosa al 0,7%
Difusión a 50 ℃
Formación de anillos de precipitación visibles.
Correlacion positiva
Cuanto mayor sea el contenido de antígeno
Cuanto mayor sea el anillo de precipitación
Se debe producir una curva estándar.
Agregue 5-7 estándares de antígenos de diferentes concentraciones al mismo tiempo
Determinar el diámetro del anillo de sedimentación.
abscisa
Concentración estándar de antígeno
Eje Y
Diámetro del anillo de sedimentación
Aplicación de anticuerpos monoclonales para medir antígenos polimórficos.
valor medido
En el lado bajo
Soltero y más bajo
Medición de proteína M utilizando anticuerpos policlonales.
valor medido
en el lado alto
Qué tan alto
método
método del tubo de ensayo
método de placa
Método de cálculo
curva de mancini
Adecuado para antígenos moleculares grandes y difusión a largo plazo (>48 horas)
El cuadrado del diámetro del anillo de precipitación d2 tiene una relación lineal con la concentración de antígeno c
c/d2=k
k: constante
curva de fahey
Adecuado para antígenos de moléculas pequeñas y tiempos de difusión más cortos.
logc/d=k
c: concentración de antígeno
d: Diámetro del anillo de sedimentación
k: constante
significación clínica
Utilizado por hospitales primarios.
Determinación del contenido de IgG, IgA, IgM y complemento C3 y C4.
Al medir la proteína M usando anticuerpos policlonales
El círculo de sedimentación se expande.
Evaluación metodológica
No muy sensible
Tiempo de detección
48-72 horas
2-3 días
Al mismo tiempo se debe generar una curva estándar.
para determinación cuantitativa
Prueba de difusión de agar bidireccional
forma
método del tubo de ensayo
Primero agregue agar que contenga anticuerpos al tubo de ensayo.
Después de la solidificación, agregue una capa de agar común en el medio.
Después de enfriar, agregue la solución de antígeno a la capa superior.
Después de la colocación, el antígeno y el anticuerpo se difunden libremente hacia la capa media de agar.
método de placa
dos agujeros
un antígeno
Ag
un anticuerpo
ab
Juicio de resultados
cerca del antígeno bien
Altos niveles de anticuerpos.
Cerca del pozo de anticuerpos.
Alto contenido de antígeno
Quien se mantiene alejado tiene más probabilidades de ser
Aparece el arco
Porque el peso molecular es pequeño.
Difundir rápidamente
Debido al pequeño círculo de difusión lenta, la concentración local es grande.
La línea de precipitación se doblará hacia el lado con mayor peso molecular.
¿De quién es la cabeza más pequeña?
Determinación del título de anticuerpos.
Valoración en tablero de ajedrez (método de valoración Founder)
Una prueba de inmunodifusión bifásica
Objetivo
Elija la concentración de trabajo óptima
La dilución más alta que fue fuertemente positiva
La concentración más baja que es fuertemente positiva.
inmunoelectroforesis
principio
campo eléctrico CC
Producto combinado de análisis electroforético y difusión en gel (reacción de precipitación)
Geles más utilizados
agarosa
concentración
0,8%-1,0%
Generalmente, la electroforesis de moléculas de proteínas en gel es casi la misma que la de la electroforesis libre.
Porque la proporción de tampón en el gel
99%
principio
Los antígenos y anticuerpos tienen carga negativa.
Porque el antígeno tiene una carga más negativa.
poner el cátodo
nadando hacia el ánodo
Porque los anticuerpos tienen menos carga negativa
Poner el ánodo
Bajo la acción de la fuerza electroosmótica.
Fuerza electroosmótica: el agua nada del ánodo al cátodo.
nadando hacia el cátodo
Inmunoelectroforesis convectiva
IgG1 e IgG2
debido a la electroósmosis
Avanzar hacia el cátodo
IgG3 e IgG4
Por la carga negativa
avanzar hacia la positividad
Clasificación
Inmunoelectroforesis por convección (CIEP)
Inmunodifusión de doble fase combinada con electroforesis.
cátodo de antígeno
Ánodo de anticuerpo
Anticuerpos IgG
debido a la electroósmosis
Se forma una línea de precipitación de color blanco lechoso en la proporción óptima de antígeno a anticuerpo.
Fenómeno llamado regresión de polos negativos inversos.
Influencia
electroósmosis
El poder electroforético del anticuerpo es menor que el poder electroosmótico.
Entonces nada hacia el cátodo
pH
¿Cuánta carga tiene una molécula?
Depende del pH del tampón
Cuanto más lejos esté el valor del pH del tampón del punto isoeléctrico
Cuanto más cargado
nadar más rápido
Punto isoeléctrico
El valor del pH de una solución cuando las proteínas se disocian en cargas positivas y negativas iguales.
Inmunoelectroforesis con cohetes (RIE)
Rango de medición
ug/ml o superior
Inmunodifusión monofásica combinada con electroforesis.
La altura del pico es proporcional a la cantidad de antígeno.
La cima del pico tiene la forma de nubes poco claras.
La electroforesis no ha llegado al punto final.
como combinado con autorradiografía
Mayor sensibilidad
1000 veces
Inmunoelectroforesis (IEP)
Inmunodifusión de doble fase combinada con electroforesis zonal.
proceso
La tecnología de zona primero
Detectar zonas no utilizadas
Después de que se detiene la electroforesis
Luego coloque suero (anticuerpo) en el tanque de anticuerpos paralelo.
Solo haz un agujero y pon el suero.
Mire la línea de sedimentación en forma de arco.
resultado
mensurable
Proteína M
significación clínica
prueba cualitativa
Análisis de proteínas séricas de mieloma múltiple y macroglobulinemia.
Proteína M
entre γ y β
Identificación de componentes antigénicos.
Identificación de anticuerpos monoclonales gamma.
Puede reflejar aproximadamente el tipo de inmunoglobulina.
sólo puede reflejar aproximadamente
No preciso
IgG
Entre α y γ lento
IgA
β y γ1
IgM
β2 o γ
IgD
β o γ
IgE
β para ralentizar γ
Electroforesis de inmunofijación (IFE)
primera persona en informar
Alfonso
Métodos inmunoquímicos (reacción de unión antígeno-anticuerpo) combinados con electroforesis zonal
principio
La tecnología de zona primero
detectar diferentes zonas
Luego cubrir las cadenas ligeras kappa y lambda con anticuerpos (anticuerpo contra cadenas ligeras kappa y lambda) o antisuero de cadena pesada (anticuerpo contra cadena pesada)
Formación de precipitado complejo.
Enjuagar y teñir
renderiza zonas coloreadas
significación clínica
Proteína M
método más utilizado
Anticuerpos monoclonicos
Identificación cualitativa y tipificada (tipo de cadena ligera y pesada)
Metodo preferido
Identificación de cadenas ligeras de inmunoglobulinas y detección de proteínas semanales en orina y tipificación κ y λ.
Gráfico de resultados
Cadenas G, A, M, kappa y lambda
SP significa proteína sérica total
Electroforesis en gel de poliacrilamida (SDS-PAGE)
principio
electroforesis de zona
El gel tiene una estructura de red.
Tiene efecto tamiz molecular
Cuanto menor sea el peso molecular
muévase más rápido
Se pueden separar varias bandas.
defecto
Las proteínas con peso molecular similar no se pueden separar.
proceso
bandas separadas
El efecto de separación es invisible a simple vista.
Las bandas electroforéticas aparecen sólo después de la tinción.
Agregue gel de apilamiento a la capa superior del gel para mejorar el efecto de separación
Proteína compacta para favorecer la natación.
La separación de proteínas séricas puede dar
Más de 20 ingredientes
electroforesis por enfoque isoeléctrico
principio
El tampón especial crea un gradiente de pH en el gel.
Geles de uso común
gel de poliacrilamida
Igual que SDS
Características
Los pesos moleculares aislados son similares.
Proteínas con diferentes puntos isoeléctricos.
radioinmunoensayo
radioinmunoensayo
Radionucleidos de uso común
125 I (yodo 125)
Método de etiquetado de 125 I (yodo 125)
notación directa
Marcado por yodación de péptidos, proteínas y enzimas.
método
Método de cloramina T (ch-T)
Método de etiquetado de lactoperoxidasa
etiquetado indirecto
Aplicable a
Compuestos de moléculas pequeñas que carecen de grupos marcadores de yodo.
método
Método de notación de conexión (método Bolton-Hunter)
Requerir
Pureza radioquímica
>95%
Requisitos de actividad inmune
>80%
Estabilizador añadido al eluato de marcadores de radionucleidos.
La misma cantidad de clara de huevo al 1%.
radioactividad específica
La intensidad de la radiactividad contenida en una cantidad química unitaria de un marcador.
Pureza radioquímica
métodos de prueba
Utilice ácido tricloroacético para precipitar todas las proteínas de la muestra que se va a analizar.
estándar de insulina
Reduce la unión máxima de la insulina 125I al antisuero en un 50%
DosisX
Dosis de proinsulina Y
Tasa de reactividad cruzada=X/Y
Título
Después de una dilución seriada de un antisuero.
reaccionar con el antígeno marcado
Metodología
alta sensibilidad
Muestras y reactivos
Menos dosis
Fuerte especificidad
Buena repetibilidad
fácil de usar
fácil de estandarizar
defecto
contaminación radioactiva
Aplicacion clinica
Hormonas (como hCG, insulina, etc.), fármacos (digoxina, morfina, barbitúricos), marcadores tumorales (AFP, CEA), trazas de proteínas.
Todas son sustancias traza.
Radioinmunoensayo (RIA)
RIA
principio
respuesta de inhibición competitiva
hay competencia
Entonces la velocidad se vuelve más lenta.
solo se puede medir
antígeno
unidad
cpm o cps
Inversamente proporcional a
Cuantos más antígenos se analicen
El material menos radiactivo
proceso
Antígenos marcados y anticuerpos conocidos.
todos son limitados
Separe el complejo antígeno-anticuerpo marcado (B) y el antígeno marcado libre (F)
método
Segundo método de precipitación de anticuerpos.
Método de precipitación con polietilenglicol (PEG)
El PEG puede precipitar de forma no específica proteínas macromoleculares, como los complejos antígeno-anticuerpo.
No precipita antígenos de moléculas pequeñas.
defecto
Más precipitaciones inespecíficas
Cuando la temperatura es superior a 30°C, el precipitado es fácil de redisolver
método reactivo PR
Conserva las ventajas de los anticuerpos secundarios y PEG.
Ahorro de dosis, separación rápida y sencilla
Método de adsorción de carbón activado.
Análisis Inmunorradiométrico (IRMA)
IRMA
principio
reacción de unión no competitiva
Puede detectar antígeno
También se pueden probar anticuerpos
IRMA de punto único
sistema de reacción
anticuerpo marcado
Antígeno o anticuerpo a probar.
Antígeno recubierto sobre fase sólida.
la diferencia
principio
Primero use el exceso de anticuerpo marcado para reaccionar con el antígeno que se va a probar.
forma compleja
en el sobrenadante
Mida la cantidad de radiación en el sobrenadante.
Luego se utiliza el antígeno en fase sólida para unir los anticuerpos marcados no unidos.
y separarlo
Puede detectar antígeno
También se pueden probar anticuerpos
IRMA de dos sitios
método sándwich de doble anticuerpo
sistema de reacción
anticuerpo marcado
Antígeno a probar
Anticuerpos recubiertos en fase sólida.
la diferencia
principio
método sándwich de doble anticuerpo
Necesidad de eliminar los anticuerpos marcados restantes
Medir la radiactividad en fase sólida
Sólo se puede realizar la prueba de antígeno.
Comparado
solicitud
células raji
Hay una gran cantidad de receptores C3b, C1q y C3d en la superficie.
sin sonrisa
Utiliza estos receptores para unirse a complejos inmunes circulantes que se unen al complemento.
Luego agregue IgG antihumana marcada con radionúclidos
Complejos inmunes circulantes detectables
Inmunotécnica de fluorescencia
Descripción general
La primera tecnología de marcado establecida
No se puede utilizar para determinación cuantitativa.
concepto
fluoresceína
Marcadores directamente implicados en la luminiscencia.
fluorescencia
Moléculas en estado fundamental (estables, de baja energía)
Después de absorber luz de una determinada longitud de onda.
Estado singlete excitado (mayor energía)
Al regresar rápidamente al estado fundamental
Emite luz de una planta de luminiscencia de excitación específica.
Eficiencia de fluorescencia
El porcentaje de fluoresceína que convierte la energía luminosa absorbida en fluorescencia.
extinción de la fluorescencia
Bajo ciertos factores físicos y químicos, la fluorescencia puede debilitarse o incluso desaparecer.
irradiación ultravioleta
alta temperatura
Utilice extintores de fluorescencia para eliminar la fluorescencia no específica.
azul de metileno
azul evans
fucsina básica
solución de yodo
sustancia fluorescente
pigmentos fluorescentes
Isotiocianato de fluoresceína (FITC)
amarillo verde
peso molecular
389,4 kDa
Luz máxima absorbida (longitud de onda de excitación)
490-495nm
Luz máxima emitida
520-530nm
El más ampliamente usado
ventaja
Los ojos humanos son sensibles al amarillo verdoso.
Generalmente hay menos fluorescencia verde en muestras seccionadas que fluorescencia roja.
Tetraetil rodamina (RB200)
Naranja
Luz máxima absorbida (longitud de onda de excitación)
570nm
Luz máxima emitida
595-600nm
Insoluble en agua
Soluble en etanol y acetona.
Se puede almacenar durante mucho tiempo.
Isotiocianato de tetrametilrodamina
rojo naranja
Luz máxima absorbida (longitud de onda de excitación)
550nm
Luz máxima emitida
620nm
Puede tener doble etiqueta con FITC
Ficoeritrina (R-RE)/(PE)
color naranja
Absorción máxima (longitud de onda de excitación)
565 nm
488 nm
Luz máxima emitida
620nm
575nm
Insoluble en agua
Soluble en etanol y acetona.
Puede tener doble etiqueta con FITC
ampliamente utilizado
Luz de excitación compartida de 488 nm.
Otras sustancias fluorescentes
Quelatos de lantánidos
Europio (Eu3)
El más ampliamente usado
Aplicable a
inmunoensayo de fluorescencia de resolución temporal
Genera fluorescencia después de la acción enzimática.
Sin efecto fluorescente en sí.
La fluorescencia se puede producir bajo la acción de enzimas.
Preparación de anticuerpos fluorescentes.
Marcado con fluoresceína de anticuerpos.
método
Método de agitación
Diálisis
Purificación de anticuerpos marcados.
método
Diálisis
separación cromatográfica
Identificación de anticuerpos.
título de anticuerpos
prueba de inmunodifusión bifásica
Cuando el contenido de antígeno es 1g/L
Título>1:16
Factores de influencia
temperatura
Cuanto menor sea la temperatura
Mayor eficiencia y mayor resistencia.
pH
Depende de pigmentos fluorescentes.
Por ejemplo, FITC disminuye en ácido
Los quelatos de lantánidos fortalecen la acidez.
concentración
Concentración demasiado alta
fenómeno autoextinguible
Debido a que es demasiado alto, las moléculas deberían chocar violentamente.
perder energía
Solvente
Impurezas fluorescentes en soluciones de etanol.
Necesita procesamiento
potenciador
Acelerar el teñido
No tiene ningún efecto sobre los efectos colorantes.
microscopio de fluorescencia
fuente de luz
fuente de luz de excitación
Lámpara de mercurio de alta presión
lampara de xenon
Lámpara halógena
filtrar
Filtro térmico
Frente al condensador de la sala de luz.
Bloquea el paso de los rayos infrarrojos y aísla el calor.
filtro de excitación
entre la fuente de luz y la lente del objetivo
Transmite luz selectivamente en el rango de longitud de onda ultravioleta visible.
Clasificación
Filtro UV (UG)
La luz ultravioleta de 275-400 nm pasa a través
Transmitancia máxima
365 nm
Filtro UV azul (BG)
La luz ultravioleta azul de 325-500 nm pasa a través de
Transmitancia máxima
410 nm
Filtro de absorción
entre la lente objetivo y el ocular
Bloquea la luz de excitación y permite el paso de la fluorescencia emitida.
fondo oscuro
Mostrar fluorescencia
fácil de observar
Ojos protegidos de fuertes irritaciones lumínicas estimulantes.
Rango de transmitancia
410-650nm
Clasificación
OG
naranja amarillo
GG
amarillo verdoso claro
otro
Ver FITC
filtro de excitación
BG12
Filtro de absorción
OG4 o GG9
Ver RB200
filtro de excitación
BG12
Filtro de absorción
OG5
Tecnología de anticuerpos fluorescentes
También conocido como
Inmunohistoquímica de fluorescencia.
Requerido para la respuesta celular o tisular.
Microscopio fluorescente
Necesito verlo bajo un microscopio.
proceso
anticuerpo marcado
Sólo se pueden marcar anticuerpos
Reaccionar con antígenos tisulares o celulares en la sección.
Después del lavado y separación.
Observar complejos y partes bajo un microscopio.
significación clínica
Caracterizar o localizar antígenos de células tisulares.
posición
¿Qué parte emite luz (núcleo, citoplasma, envoltura, etc.)
Se pueden realizar pruebas de localización de antígenos.
Tecnología de anticuerpos fluorescentes
inmunoquímica tisular enzimática
preparación de especímenes
Debe tener celdas
Suero y plasma no son aceptables.
fuente
Secciones de tejido, impresiones de tejido, frotis de células, frotis microbianos, frotis de células exfoliadas, muestras de fluidos corporales concentrados (sedimentos de derrame pleural y ascitis)
Tipos
método directo
Reaccionar directamente con el antígeno.
etiquetado en el anticuerpo
Sólo se puede comprobar el antígeno.
Características
Máxima especificidad
Método con la tinción inespecífica más baja.
Alta especificidad directa
mala sensibilidad
Pocos factores de tinción fluorescente no específicos.
método indirecto
Pruebe anticuerpos desconocidos utilizando antígenos conocidos
anticuerpo primario
humanoIg
anticuerpo secundario
Ig de luciérnaga o de oveja/conejo marcada con enzimas
Lo mismo ocurre con las pruebas ELISA de anticuerpos.
Hay anticuerpo secundario.
Etiquetado en anticuerpo secundario
Anticuerpo secundario marcado con fluoresceína conjugado con el anticuerpo primario
Puede detectar antígeno
También se pueden probar anticuerpos
Ventajas frente al método directo
Detectar diferentes antígenos
Simplemente prepare un anticuerpo fluorescente.
Porque la fluoresceína está marcada en el anticuerpo secundario.
Detección
anticuerpos antinucleares
El mas efectivo
método de doble etiquetado
Etiquetar diferentes anticuerpos con FITC y rodamina respectivamente.
Teñir el mismo espécimen
Aplicacion clinica
No sustituye a otras pruebas de rutina.
Prueba de autoanticuerpos
Anticuerpos antinucleares (ANA) en suero
Detección de patógenos
Identificar patógenos
Niveles de anticuerpos específicos en suero.
Pruebas inmunopatológicas
Detección de antígenos de superficie y receptores.
Identificación de linfocitos y subpoblaciones.
Citometría de flujo
Tipo de inmunoensayo de fluorescencia
Inmunoensayo de fluorescencia de resolución temporal (TRFIA)
principio
Con elementos lantánidos
Etiquetar antígeno o anticuerpo
Determinado utilizando técnicas resueltas en el tiempo.
resolución de tiempo
fluorescencia no específica
La vida útil de la fluorescencia es corta
Quelatos de lantánidos
Larga vida útil de la fluorescencia
Después de la decadencia de la fluorescencia no específica.
Detectar la señal fluorescente nuevamente.
Desplazamiento de alimentaciones
Diferencia de longitud de onda entre el espectro de excitación y el espectro de emisión.
Si el desplazamiento de Stokes es pequeño
Los espectros de excitación y emisión a menudo se superponen
interferir el uno con el otro
Los quelatos de lantánidos tienen grandes desplazamientos.
Elimina fácilmente la interferencia dispersa de la luz de excitación.
Intensidad de señal
La fluorescencia se puede mejorar en una solución ácida de mejora.
Aplicacion clinica
similar al radioinmunoensayo
Detectar sustancias traza
Una proteína más por detectar
Inmunoensayo de polarización de fluorescencia (FPIA)
principio
Usando reacciones de competencia antígeno-anticuerpo
Diferencia en el grado de polarización de fluorescencia del antígeno marcado y del complejo.
solicitud
en sangre u orina
Determinación de moléculas pequeñas.
concentración de droga
Primer método
Inmunoensayo enzimático fluorescente
principio
Utilice la reacción del antígeno y el anticuerpo, con la ayuda del sustrato fluorescente de reacción enzimática
El anterior es el método sándwich de doble anticuerpo.
Agregar sustrato
proceso
El sustrato 4-MUP no tiene fluorescencia.
Emite fluorescencia bajo la estimulación de ALP.
Analizador de citometría de flujo (FCM)
Descripción general
Utilizar las características de la óptica integrada, la mecánica de fluidos, la tecnología informática electrónica y la fluoresceína para producir fluorescencia.
Tecnología para medición cuantitativa multiparamétrica y clasificación de cada celda.
Fuentes de luz de uso común
luz emitida
Luz absorbida por la fluoresceína.
láser
estructura
Sistema de flujo de líquido
Sistema de prueba de conversión óptica y de señal.
Sistemas informáticos para procesamiento y amplificación de señales.
principio
Suspensiones unicelulares y fluidos de envoltura etiquetados con combustibles fluorescentes específicos
Ingrese a la sala de flujo
Formar una columna de líquido unicelular que encapsula la suspensión celular en el líquido envolvente.
Columna de líquido y rayo láser horizontal (fuente de luz de excitación)
intersección vertical
datos
Luz difusa hacia adelante (FS)
tamaño de partícula
Luz difusa lateral (SS)
La complejidad dentro de la partícula.
suavidad de la superficie
Es lo mismo que las cinco categorías.
Fluorescencia (FL)
El número de partes fluorescentes teñidas por partículas.
tinción PI
ciclo celular
Marcadores de ADN de uso común
PI (yoduro de propidio)
Longitudes de onda de excitación comúnmente utilizadas
488 nm
Longitudes de onda de emisión comúnmente utilizadas
620nm
Clasificación de la tasa de cosecha
Existe una relación correspondiente entre la tasa de cosecha y la pureza.
Alta pureza de células clasificadas.
La tasa de cosecha es relativamente baja.
fluido de vaina
efecto
Envuelva el flujo de muestra
Centrar el flujo de muestra en la boquilla.
Precisión garantizada
Evite que las células se acerquen a la pared de la boquilla y bloqueen el orificio.
solicitud
Subconjuntos de células T
Máxima sensibilidad de detección
Células B teñidas con anticuerpos fluorescentes anti-Ig
La superficie muestra cambios de fluorescencia con el tiempo.
anillo, punto, tapa, desaparecer
inmunoensayo enzimático
inmunoensayo enzimático
Aprovechando la actividad catalítica eficiente y específica de las enzimas
conjugado enzimático
Antígeno o anticuerpo marcado con enzima
Biomagnificación de sustratos catalíticos.
Una pequeña cantidad de enzima puede reflejar una gran cantidad de sustancias.
Tecnología de marcado
Antígeno o anticuerpo
Posicionamiento, cualitativo, cuantitativo.
Características
enzimas y sustratos
requisitos de enzimas
Fuerte actividad
Alta pureza
Fácil de acoplar con antígeno y anticuerpo.
La actividad es estable después del etiquetado.
No afecta la reactividad inmune de antígenos y anticuerpos.
especificidad
No hay ninguna enzima endógena o inhibidor idéntico a la enzima marcada presente en la muestra que se está analizando.
productos producidos por catálisis enzimática
fácil de juzgar o medir
Enzimas de uso común
Peroxidasa de rábano picante (HRP)
sustrato
Tetrametilbencidina (TMB)
más comúnmente utilizado
azul
buena estabilidad
No es necesario evitar la luz, no hay efecto mutagénico.
defecto
Poca solubilidad en agua
O-fenilendiamina (OPD)
Uno de los sustratos cromógenos más sensibles.
naranja amarillo
inestable
Disponible en tabletas o en polvo.
Reconstituir antes de usar
concepto
Derivado de vegetales
una glicoproteína
Contenido de azúcar 18%
composición
glicoproteína incolora
enzima principal
Independiente de la actividad enzimática
Pico máximo de absorción
275nm
Rojo sangre ferrosa
coenzima
grupo activo de enzima
Pico máximo de absorción
403nm
más comúnmente utilizado
Fosfatasa alcalina (AP/ALP)
sustrato
p-Nitrofenilfosfato (p-NPP)
color
amarillo
concepto
Extraído de E. coli o mucosa intestinal de ternera.
Clasificación
Bacteriogénico
mucosa intestinal
Alta actividad
β-galactosidasa (β-Gal)
sustrato
4-metilumbelanoil-R-D galactopiranósido (4-MUU)
Características
Mayor sensibilidad que HRP
30-50 veces
Pero al medir, es necesario.
fluorómetro
concepto
Extracción de Escherichia coli
La sangre humana carece de esta enzima.
Sin interferencias de enzimas endógenas durante la medición
Marcadores enzimáticos
Método de marcado
Método de reticulación de glutaraldehído
Método de peryodato de sodio modificado
Antígeno y anticuerpo marcados con HRP (peroxidasa de rábano picante)
método más utilizado
Portador de fase sólida
El vehículo en fase sólida más utilizado para ELISA
poliestireno
cubierto
El proceso de unión de un antígeno o anticuerpo a un soporte sólido.
Buffer
PH9.6
tampón de carbonato
cerrado
1%-5% de albúmina sérica bovina o 5%-20% de suero de ternera
Cubierto de nuevo
Eliminar el desarrollo de color no específico
Previene la entrada de proteínas impurezas en el suero e interfiere con los resultados.
Clasificación
inmunohistoquímica enzimática
utilizado en patología
Localización de antígenos en secciones de tejido u otras muestras.
solo antígeno
Solo posicionamiento
Inmunoensayo enzimático (EIA)
Calificación o cuantificación de antígenos o anticuerpos en líquidos
Inmunoensayo enzimático homogéneo
Tecnología de inmunoensayo amplificado enzimáticamente (EMIT)
Inmunoensayo de donante de clonasa (CEDIA)
La enzima marcada en el antígeno está inactiva. Sólo activo después de la unión específica
inmunoensayo enzimático heterogéneo
inmunoensayo enzimático en fase sólida
inmunoensayo enzimático en fase líquida
Separar y distinguir marcadores enzimáticos unidos y libres según sea necesario
separados en fases heterogéneas
El divorcio requiere separación
Inmunoensayo enzimático homogéneo
Homogéneo sin separación
No hay necesidad de transportista
inmunoensayo enzimático
ley de Competencia
principio
La enzima combinada pierde su actividad.
Prueba de actividad enzimática
Lo que falta es la enzima de unión.
ventaja
Para medir antígenos de molécula pequeña (hormonas) o haptenos (fármacos)
inmunoensayo enzimático heterogéneo
separación de fases heterogénea
principio
La enzima combinada permanece activa.
Solo necesito lavar la tabla.
Es una fase diferente
Clasificación
inmunoensayo enzimático en fase líquida
Determinación de cantidades extremadamente pequeñas de hormonas peptídicas cortas.
Fármacos y otros haptenos de moléculas pequeñas.
Sensibilidad
ng a pg
inmunoensayo enzimático en fase sólida
Utilice soportes sólidos como soportes.
común
Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA)
Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA)
Cómo detectar antígenos
Método sándwich de doble anticuerpo (método de dos pasos)
proceso
anticuerpo de fase sólida
Primero conecte el anticuerpo específico al portador de fase sólida.
Reacción antígeno-anticuerpo
Agregue el antígeno a probar.
Formación de complejo anticuerpo-antígeno en fase sólida.
primer lavado
Anticuerpos marcados con enzimas
Añadir anticuerpos marcados con enzimas
Formación de un complejo anticuerpo-antígeno-enzima-anticuerpo marcado en fase sólida (en dos epítopos diferentes del antígeno que se va a analizar)
segundo lavado
desarrollo del color
Agregue sustrato para desarrollar el color.
La cantidad de producto coloreado es proporcional al antígeno a probar.
Aplicable a
método más utilizado
Antígenos multivalentes con al menos dos epítopos.
antígeno macromolecular
Como el antígeno de superficie de la hepatitis B, alfafetoproteína, hCG
molécula de adhesión soluble extracelular
antígeno soluble
Dos sitios (método de un paso)
proceso
Combine el antígeno que se va a probar y el anticuerpo marcado con enzima.
Únete a la reacción al mismo tiempo.
Los dos anticuerpos no interfieren entre sí.
Después de un lavado
Agregue sustrato para desarrollar el color.
defecto
Cuando la concentración del antígeno a analizar es demasiado alta
efecto gancho (fenómeno de la banda trasera)
Reproducción cromática reducida
falso negativo
Las muestras se pueden diluir y volver a analizar.
ley de Competencia
Inversamente proporcional a
Cuanto mayor sea la cantidad de antígeno a medir
Los productos menos coloreados
proceso
anticuerpo de fase sólida
Primero conecte el anticuerpo específico al portador de fase sólida (cantidad limitada)
Reacción antígeno-anticuerpo
Agregue el antígeno a analizar y el antígeno marcado con enzima (cantidad limitada)
Anticuerpos específicos de unión competitivos
Lavado
desarrollo del color
Agregue sustrato para desarrollar el color.
Aplicable a
Antígenos de molécula pequeña con un solo epítopo.
Drogas, hormonas, etc.
Cómo detectar anticuerpos
método indirecto
Anticuerpos contra el virus de la hepatitis C
proceso
antígeno de fase sólida
Recubrimiento del antígeno sobre un portador en fase sólida.
Reacción antígeno-anticuerpo
Agregue el anticuerpo a probar.
Se probará la formación de un complejo antígeno-anticuerpo en fase sólida
primer lavado
Anticuerpo secundario marcado con enzima
Añadir anticuerpo secundario marcado con enzima (IgG antihumana de cabra)
Formación de un complejo de anticuerpo secundario antígeno-anticuerpo a detectar-enzima-marcado en fase sólida
segundo lavado
Un marcador detecta múltiples analitos
Los anticuerpos secundarios marcados con enzimas pueden detectar cualquier complejo antígeno-anticuerpo
desarrollo del color
Directamente proporcional
ley de Competencia
Anticuerpo central del virus de la hepatitis B (HBcAb), anticuerpo e del virus de la hepatitis B (HBeAb)
Inversamente proporcional a
Cuanto mayor sea la cantidad de anticuerpo a medir
Los productos menos coloreados
proceso
antígeno de fase sólida
Recubrimiento del antígeno sobre un portador en fase sólida.
edición limitada
Reacción antígeno-anticuerpo
Agregue el anticuerpo que se va a probar y el anticuerpo marcado con enzima (cantidad limitada)
Anticuerpos específicos de unión competitivos
Lavado
desarrollo del color
Agregue sustrato para desarrollar el color.
Factores de influencia
Centrifugación insuficiente de la muestra
presencia de fibrina
Las etiquetas enzimáticas se adhieren a la fibrina
Dando como resultado que no se pueda lavar
color oscuro
falso negativo
Hemólisis
Porque la hemólisis es de color oscuro.
falso negativo
método sándwich de doble antígeno
sensibilidad y especificidad
método superior al indirecto
solicitud
Detección de anticuerpos de superficie de la hepatitis B.
método de captura
También conocido como método indirecto inverso.
proceso
Anticuerpo secundario contra IgM recubierto sobre un soporte en fase sólida
Agregar muestra para ser analizada
La IgM puede ser capturada por portadores en fase sólida.
Agregar antígeno específico
Agregar anticuerpos marcados con enzimas a antígenos específicos
Formación de un complejo de anticuerpo secundario anticuerpo-IgM-antígeno-anticuerpo marcado con enzima en fase sólida
solicitud
Anticuerpo tipo IgM
solicitud
factor de adhesión soluble extracelular
ELISA
Principales métodos de medición.
Tecnología de inmunoensayo de quimioluminiscencia.
principio
Combinando la alta sensibilidad del análisis de luminiscencia con la alta especificidad del antígeno y el anticuerpo
Tecnología de inmunoensayo etiquetado para detectar trazas de antígenos o anticuerpos
Igual que el radioinmunoensayo
Método de marcado
método de condensación de carbodiimida
agente condensante
carbodiimida
Método de oxidación del periodato de sodio.
Las glicoproteínas marcadas tienen buena estabilidad.
No es fácil caerse
Método de acoplamiento de sal de diazonio
Sencillo, de bajo coste y buena repetibilidad.
Método de activación de N-hidroxisuccinimida
brillo
Estado fundamental
absorber la luz
saltar al estado excitado
volver al estado fundamental
El proceso de liberación de fotones.
Mismo principio que la fluorescencia.
agente quimioluminiscente
tipo
inmunoensayo de quimioluminiscencia directa
Utilice éster de acridinio
en ambiente alcalino
Marcado directo de antígenos (anticuerpos)
Se produce una reacción antígeno-anticuerpo.
Inmunoensayo enzimático quimioluminiscente
Marcadores enzimáticos implicados en la luminiscencia mediante reacciones catalíticas o transferencia de energía.
Utilice peroxidasa de rábano picante o fosfatasa alcalina.
Etiquetar antígeno o anticuerpo
Se produce una reacción antígeno-anticuerpo.
Inmunoensayo de quimioluminiscencia de micropartículas.
Marca
fosfatasa alcalina
Inmunoensayo de electroquimioluminiscencia
Participar en reacciones de oxidación mediante transferencia de energía.
Anticuerpo (antígeno) marcado con terpiridina de rutenio
tripropilamina
Donante de electrones (aceptor de electrones)
En el campo eléctrico, se produce una reacción quimioluminiscente específica en la superficie del electrodo debido a la transferencia de electrones.
Incluyendo dos procesos: electroquímica y quimioluminiscencia.
ventaja
Similar al radioinmunoensayo
Pero no hay contaminación
Alta sensibilidad y fuerte especificidad.
ng o incluso pg
Amplio rango lineal
El marcador es estable.
El reactivo tiene un largo período de validez y no es tóxico.
alto grado de automatización
solicitud
Hormonas, marcadores tumorales, concentraciones de fármacos, marcadores miocárdicos, anticuerpos virales y otras actividades biológicas traza.
Detección
pequeña cantidad de
Tecnología de amplificación de biotina-avidina.
biotina activada
Utilizando el grupo carboxilo de la biotina.
Utilice modificaciones químicas para producir derivados de varios grupos reactivos.
Después de la activación
Se acopla fácilmente a los grupos correspondientes en diversos antígenos, anticuerpos, enzimas y moléculas de ácido nucleico.
marcadores biotinilados
estructura
yo llamo
anillo de cobre imidazol
Avidina: triptófano
II anillo
anillo de tiofeno
Anticuerpos de unión y otras moléculas grandes.
Biotina (B)
Avidina (A)
alta afinidad
Combinado con rápido, específico y estable.
Avidina
forma de cruz
Biotina
triángulo
Avidin tiene cuatro sitios y puede unirse a 4 biotinas.
Entonces hay una reacción de amplificación.
Etiquetar diferentes tipos de biotina activada
biotina activada
No se pueden etiquetar grupos carboxilo
Porque fue una modificación química hecha por él.
Aplicaciones del sistema biotina-avidina (BAS)
B: biotina, A: avidina, S: amplificación
Método de etiquetado de avidina
método de peryodato de sodio
método ABC
principio
C: El significado de enzima
enzima marcadora de biotina
avidina fijadora de biotina
Avidina conjugada con anticuerpo biotinilado
enzimas y anticuerpos marcados
es todo biotina
La avidina sólo se utiliza para unirse a la biotina.
acoplado a ELISA
Mejora enormemente la sensibilidad de ELISA.
La enzima está marcada en
en biotina
inmunoensayo de membrana en fase sólida
Membranas de fase sólida de uso común
Membrana de nitrocelulosa (NC)
oro coloidal
Los complejos antígeno-anticuerpo están marcados con partículas de oro.
bajo microscopio
Partículas de color marrón oscuro
ojo desnudo
manchas rojas o rosadas
HCG
Detectar hCG
Prueba de oro coloidal con anticuerpo monoclonal
Mayor sensibilidad
prueba de hCG durante la ovulación
Para evitar reacciones cruzadas
Inmunoensayo enzimático monoclonal de dos puntos
8-10 semanas
alcanzar el pico
La hCG en suero es ligeramente mayor que en la orina.
La única hormona que no aumenta su secreción a medida que aumenta el peso de la placenta.
Diferenciar el embarazo molar del embarazo normal
prueba cuantitativa de concentración de hCG
Clasificación
Prueba de inmunofiltración de oro punteado
en película de Carolina del Norte
El líquido fluye verticalmente hacia abajo.
Oro coloidal como ropa pulmonar.
Ensayo inmunocromatográfico de puntos de oro.
en película de Carolina del Norte
flujo horizontal líquido
como tiras reactivas de embarazo
Prueba de inmunomancha ligada a enzimas (ELISPOT)
Células B medibles
secretar anticuerpos específicos
También se puede medir la secreción de anticuerpos.
Células T medibles
Células T secretoras de citocinas
Western-blot/wb
proceso
tres fases
Electroforesis en gel de SDS-poliacrilamida (SDS-PAGE)
electroforesis de zona
electrotransferencia
en condiciones de electroforesis de transferencia
Transferir a membrana de nitrocelulosa (membrana NC)
Transferir proteína a una membrana en fase sólida.
Aún invisible a simple vista
Detección de reacción enzimática
Proteína transferida (equivalente a un portador en fase sólida recubierto con antígeno)
Reaccionar con anticuerpos específicos y anticuerpos secundarios marcados con enzimas.
Agregue sustrato para desarrollar el color.
SDS-PAGE y ELISA completos
Aplicacion clinica
VIH
prueba confirmatoria
Detección de componentes de anticuerpos.
Aparece gp41/gp120/gp160
dos tiras en
Si muere, llama al 120 y no lo curará. Se escapará.
gp120 se une a CD4
Destruir las células T CD4
CD4/CD8
La proporción disminuye
Ensayo de anticuerpos anti-antígeno extractivo (anticuerpo ENA)
mancha del sur
Métodos de transferencia para detectar ácidos nucleicos.
inmunohistoquímica
Descripción general
inmunohistoquímica
anticuerpos específicos marcados
Pruebas para localizar, cuantificar e identificar cualitativamente antígenos.
Sólo se puede realizar la prueba de antígeno.
Fuente de la muestra
tejido vivo
Secciones de tejido
Diversos fluidos corporales y fluidos de punción (el suero y el plasma no son aceptables porque no tienen células)
Manchas y huellas
Células cultivadas
Diapositiva de células vivas
El propósito de la fijación de muestras.
proteína de coagulación
Terminar la acción de las enzimas intracelulares.
Prevenir la autólisis
Mantener la forma y estructura celular.
Mantener la antigenicidad celular.
Evitar que las capas de células se caigan.
Eliminar los lípidos que impiden la unión de anticuerpos.
Inhibir el crecimiento bacteriano
Anticorrosión
Proceso de inmunohistoquímica
Extracción y purificación de antígenos.
Antígeno a probar
Inmunización de animales y fusión celular.
Preparación de anticuerpos específicos.
tecnología de hibridoma
Purificación de anticuerpos
Marcadores conjugados con anticuerpos.
Formar anticuerpos marcados.
Manipulación y preparación de muestras.
reactivo primario
Anticuerpo
Anticuerpos monoclonicos
Como sólo puede detectar tejido, debe ser un antígeno, por lo que sólo puede detectar antígenos.
paso clave
Inmunotinción
histoquímica de inmunofluorescencia
Anticuerpos marcados con fluoresceína
Sólo se puede realizar la prueba de antígeno.
Características
Puede detectar múltiples antígenos en muestras simultáneamente
Ventajas frente a las técnicas de inmunohistoquímica enzimática
Durante la observación con microscopía de fluorescencia.
Precauciones
Observar las muestras inmediatamente después de la tinción.
No es aconsejable observar un campo de visión durante mucho tiempo.
Utilice aceite para lentes no fluorescente
Observación del cuarto oscuro
error
La observación es mejor a 37 ℃
inmunohistoquímica enzimática
Utilice anticuerpos (antígenos) marcados con enzimas
Se pueden medir anticuerpos y antígenos.
Clasificación
Tecnología de inmunohistoquímica de anticuerpos marcados con enzimas
Igual que el inmunoensayo enzimático
Método de puente enzimático-tinción histoquímica inmunoenzimática de anticuerpo no marcado
La enzima no está marcada en el anticuerpo.
Anticuerpos antienzimáticos como terceros anticuerpos.
Tener un anticuerpo puente como anticuerpo secundario.
Formación del complejo anticuerpo-anticuerpo antienzima-anticuerpo puente específico del antígeno de prueba
Método PAP de tinción enzimática de anticuerpos no marcados (método peroxidasa-antiperoxidasa)
El tercer anticuerpo es diferente.
El tercer anticuerpo (anticuerpo antienzimático) y la enzima forman un complejo soluble (complejo PAP)
Este complejo consta de 2 anticuerpos antienzimáticos y 3 enzimas peroxidasas.
estructura pentagonal
muy estable
inmunidad al trasplante
Clasificación
autotrasplante
El injerto se deriva del propio huésped.
Sin reacción de rechazo
trasplante singénico
Trasplante entre individuos genéticamente idénticos
Gemelos idénticos
Las reacciones de rechazo generalmente no ocurren.
trasplante alogénico
Trasplante entre individuos de la misma especie pero con genotipos diferentes
antígeno diana que causa rechazo
antígeno mayor de histocompatibilidad (MHA)
Antígeno mayor de histocompatibilidad (MHA) del complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) en el cromosoma 6
También conocido como antígeno leucocitario humano (HLA)
MHC humano = HLA
Clasificación
HLAI
HLA-A, HLA-B, HLA-C
Todas las superficies celulares nucleadas.
La mayoría de los linfocitos
células nerviosas
sin núcleo
HLA-C
No tiene ningún efecto significativo sobre el proceso inmunológico del trasplante.
ALH II
HLA-DR, HLA-DQ, HLA-DP
Distribuido en células APC profesionales, células T activadas y células epiteliales del timo.
dominio tipo inmunoglobulina
Dominios funcionales α2 y β2
Región de unión al polipéptido antigénico
Dominios funcionales α1 y β1
región de unión a CD4
área funcional β2
HLA-DR
El más inmunogénico.
Lo más importante para el rechazo de trasplantes.
Método de los CDC para detectar el antígeno HLA-DR
Células a probar
células B purificadas
Porque las proteínas de clase II están presentes en la superficie de las células B y los macrófagos (APC profesionales)
No se descartan interferencias de clase HLA-I
con células B purificadas
tipificación biológica
PCR-RFLP
PCR-SSO
El método más utilizado para la tipificación de HLA clase II.
PCR/SSP
principio
Diseñar un conjunto de cebadores específicos de secuencia (SSP) para alelos HLA
Amplificación por PCR del ADN que se va a probar.
conseguir
productos de amplificación específicos de alelos
PCR-SSCP
SBT
El método más preciso e intuitivo
debe
Aislamiento de ADN de las células a analizar.
Amplificación por PCR utilizando cebadores específicos de locus, grupo o alelo
Purificación y secuenciación de productos amplificados.
Comparación de la secuencia genética medida con la secuencia de ADN conocida del banco de genes
Citología de tipificación HLA
tipificación negativa
celdas estándar
Células de tipo homocigoto con un solo antígeno LD en su superficie.
mecanografía positiva
celdas estándar
linfocitos presensibilizados
Estructura y función de las moléculas del MHC.
MHC
Un grupo de genes estrechamente relacionados en un cromosoma que codifica los principales antígenos de histocompatibilidad.
MHC-I
Las células Tc sólo pueden destruir las células tumorales si expresan MHC-I.
Las plaquetas expresan sólo MHC-1
MHC-II
Marcadores de superficie importantes de las células presentadoras (APC)
Las células B pueden expresar MHC clase I y clase II.
Reconocido por las células T CD4 auxiliares.
Cinta
Epítopos alotípicos (porción polimórfica de moléculas HLA de clase II)
Región de unión al péptido antigénico
Reconocer moléculas CD4 y CD8.
área de muestra de ig
Región similar a la inmunoglobulina: dominio β2
Anclaje de moléculas HLA a la membrana celular.
región transmembrana
y señalización intracelular
Región intracelular (región citoplasmática)
HLA-II
Región de unión al polipéptido antigénico
Dominios funcionales α1 y β1
dominio tipo inmunoglobulina
Dominios funcionales α2 y β2
región de unión a CD4
área funcional β2
Factores que determinan el polimorfismo del MHC
Los genes MHC son alelos múltiples.
son codominantes
vía de identificación
vía de identificación directa
APC donante
Antígeno de trasplante de donante (MHC)
presentado a las células T receptoras
vía de identificación indirecta
DestinatarioAPC
Antígeno de trasplante de donante (MHC)
presentado a las células T receptoras
Reconocimiento del MHC del donante por parte de las células T.
molécula reconocida
Son péptidos derivados de moléculas alotipo MHC procesadas.
Siempre que exista un aminoácido de diferencia entre el donante y el receptor
Puede ocurrir una reacción de rechazo.
tipo
Reacción huésped versus injerto (HVGR)
Rechazo del Donante por parte del Receptor
Reacción injerto contra huésped (GVHR)
Rechazo del donante al destinatario
Reacción huésped versus injerto (HVGR)
Clasificación
rechazo hiperagudo
En cuestión de minutos a 1-2 días
Se produce un rechazo humoral irreversible.
Rápido, fuerte, irreversible
respuesta inmune humoral
sustancia principal mediadora
Anticuerpos citotóxicos (células T citotóxicas/células T asesinas/células Tc)
razón
Personas con tipos de sangre ABO y otros tipos de sangre incompatibles, tipos de sangre Rh incompatibles, embarazos múltiples, transfusiones de sangre repetidas o aquellos que han recibido trasplantes de órganos.
Mala perfusión del órgano trasplantado o tiempo de isquemia excesivo
Conservación y manipulación inadecuada de los injertos.
rechazo agudo
semanas a meses
tipo más común
diagnóstico
Los valores de sIL-2R y creatinina sérica aumentaron simultáneamente
Método de incorporación de 4 horas de 3H-TdR
Ensayo de transformación celular de 4 horas 3H-TdR
Métodos para detectar células T sensibilizadas en receptores.
Una prueba satisfactoria para predecir crisis de rechazo agudo
Diferenciación entre rechazo agudo e infección viral.
1-5 días antes de que aparezcan los síntomas clínicos.
Aumento de la proporción CD4/CD8
>1.2
Indica que el rechazo agudo está a punto de ocurrir.
infección por citomegalovirus
Disminución de CD4/CD8
<1.08
Alta posibilidad de infección.
rechazo crónico
meses o incluso años
La enfermedad progresa lentamente.
Reacción injerto contra huésped (GVHR)
transplante de médula osea
Si no recibe tratamiento inmunosupresor
Depende del HLA-DR
Antes del tratamiento, se requieren dosis altas de radioterapia y quimioterapia para destruir todas las células de la médula ósea.
exhibir incompetencia inmune
mostrar esto
Sólo requiere compatibilidad con el tipo de sangre ABO.
La médula ósea que ingresa al cuerpo del receptor tiene una gran cantidad de células inmunes.
Puede llevar a cabo una respuesta inmune a los órganos y tejidos del receptor.
Tipificación serológica HLA
Prueba de citotoxicidad dependiente de microcomplementos (CDC)/prueba de microlinfocitotoxicidad
Métodos de tipificación HLA-I y HLA-II
Prueba de citotoxicidad dependiente del complemento
genéticamente predispuesto
No identificable
HLA-DP
Se requiere tipificación citológica de HLA para la identificación.
Identificación de células presensibilizadas mediante tipificación celular.
Sueros de tipificación estándar anti-HLA específicos conocidos
Anticuerpos conocidos
Si se caracteriza como anti-HLA-DR o DQ
Uso de plaquetas para adsorber anticuerpos HLA-I
Combinar con linfocitos a analizar.
Antígeno a probar
agregar complemento
Tipificación citológica de HLA
HLA-DP identificable
Celdas estándar utilizadas
tipificación negativa
Células de tipo homocigoto con un solo antígeno LD en su superficie.
mecanografía positiva
linfocitos presensibilizados
Prueba bidireccional de linfocitos mixtos/prueba de linfocitos mixtos
Determinar si los antígenos HLA del donante y del receptor son compatibles
Si la cantidad de infiltración y células transformadas es la mayor
Indica una fuerte positividad de MLC
Indica una falta de coincidencia total del antígeno D
No se puede determinar el tipo HLA
Prevención y tratamiento
Prueba cruzada de HLA
Prueba de compatibilidad cruzada de linfocitos (prueba de toxicidad cruzada de linfocitos)
prueba de toxicidad cruzada de linfocitos
Objetivo
Si hay anticuerpos contra los linfocitos del donante en el suero del receptor.
Linfocitos del donante
Anticuerpos en el suero receptor.
Reacción monofásica de linfocitos mixtos entre células del receptor y células del donante tratadas con romicetina C
y cruce
Igual que el lado principal
tratar
Terapia alogénica con anticuerpos anti-CD3
Complicaciones más importantes
enfermedad del suero
inmunidad tumoral
Macrófagos
Macrófagos infiltrantes en lesiones tumorales.
y diseminación tumoral y metástasis
correlación negativa
Mecanismo de acción antitumoral.
Mata las células tumorales a través de la vía ADCC.
antígeno tumoral
Recién surgido o sobreexpresado durante la aparición y desarrollo del tumor.
Sustancias antigénicas
clasificación específica
Antígeno tumoral específico (TSA)
Neoantígenos específicos de células tumorales.
Sólo se expresa en células tumorales.
Células tisulares ausentes y normales.
antígeno de rechazo asociado al melanoma
MARÁ
antígeno específico de la próstata
PSA
antígeno asociado al tumor
No específico de células tumorales.
Los tejidos y células normales también expresan
Cuando ocurre el cáncer
El contenido aumentó significativamente.
alfafetoproteína
AFP
Mecanismo de efecto antitumoral.
inmunidad celular
El papel más importante
Células T, células NK, macrófagos.
Mecanismo inmune humoral
Efecto citolítico del complemento.
efecto anticuerpo
Citotoxicidad mediada por células dependiente de anticuerpos (ADCC)
Fagocitosis inmunomoduladora de anticuerpos.
Los anticuerpos bloquean ciertos receptores en la superficie de las células tumorales.
Los anticuerpos se unen a los receptores y bloquean la señalización en las células tumorales
Los anticuerpos interfieren con la adhesión de las células tumorales
Marcadores tumorales comunes
antígenos embrionarios
Alfafetoproteína (AFP)
cáncer de hígado primario
AFP>300ug/L
elevar
mujeres embarazadas
recién nacido
hepatitis aguda
cáncer de hígado primario
Curvas dinámicas AFP y ALT
Diferenciación entre cáncer de hígado y enfermedad hepática benigna (hepatitis activa)
seguidor de curva dinámica
enfermedad hepática benigna
Tan alto como quieras
separador de curva dinámica
AFP elevada
Disminución de ALT
Considere el cáncer de hígado
Antígeno carcinoembrionario (CEA)
Tiene múltiples isoformas
CEA-A, CEA-P, CEA-M, etc.
Contiene determinantes antigénicos complejos y múltiples glicoproteínas isoméricas.
fumador
Aumento leve
Tumores intestinales
Cáncer de colon, cáncer de recto, cáncer de páncreas.
Antígenos de la cadena de azúcar
CA153
cáncer de mama
¿Quieres que toque?
Pechos para tocar
CA125
cáncer de ovarios
quieresme
Un hijo está por nacer, así que en el ovario.
Proteína 4 del epidídimo humano (HE4)
Nuevos marcadores tumorales
cáncer de ovarios
CA199
tumores gastrointestinales
quiero 99
No lo puedo digerir, cuesta 99
cáncer de páncreas
9 Visto de lado, parece un páncreas.
Cáncer de páncreas, cáncer de vesícula biliar, cáncer de colon, cáncer de estómago
Antígeno del carcinoma de células escamosas (SCCA)
Carcinoma de células escamosas
Carcinoma de células escamosas de esófago
cáncer de cuello uterino
Enzimas e isoenzimas
Antígeno prostático específico (PSA)
Cancer de prostata
marcadores tumorales específicos de órganos
Relación f-PSA y f-PSA/t-PSA
Diferenciación entre cáncer de próstata y enfermedades benignas de la próstata
Tanto el t-PSA como el f-PSA están elevados.
Relación f-PSA/t-PSA
<10%
El cáncer de próstata es probable
Fosfatasa ácida prostática (PAP)
Cancer de prostata
Enolasa neuronal específica (NSE)
Cáncer de pulmón de células pequeñas (carcinoma de células de avena)
a-L-fucosidasa (AFU)
cáncer de hígado primario
No relacionado con AFP
efecto complementario
La AFU elevada también se puede observar en AFP negativa.
hormonas
Ácido vainililmandélico (VMA)
Feocromocitoma
gonadotropina coriónica humana
Tumores de trofoblasto y tumores de células germinales.
Mola hidatidiforme, mola erosiva, coriocarcinoma
calcitonina
cáncer medular de tiroides
hormona adrenocorticotrópica (ACTH)
Cáncer de pulmón de células pequeñas (carcinoma de células de avena)
proteína
β2-Microglobulina (β2-MG)
Malignidad, mieloma, linfoma, enfermedad renal.
Porque la β2-microglobulina
Se encuentra en la superficie de todas las células nucleadas.
ferritina
tumores malignos, inflamación
Proteína de la semana (BJP)
mieloma múltiple
Expresa antígeno del grupo sanguíneo ABO.
células cancerosas gástricas
No es posible ser
monosacárido
enfermedad de inmunodeficiencia
enfermedad de inmunodeficiencia primaria
deficiencia primaria de células B
Agammaglobulinemia ligada al cromosoma X
Gammaglobulina = inmunoglobulina
Síndrome de Bruton
Ausencia de amígdalas
Manifestaciones clínicas comunes.
concepto
Agenesia congénita de células B
Células B reducidas o defectuosas
Anticuerpos reducidos o deficientes.
Difícil de encontrar en la médula ósea.
Célula de plasma
Número normal de células T
Se produjeron infecciones recurrentes en el niño 6 meses después del nacimiento (niño preescolar)
Resistencia actual a IgG e IgA secretora dentro de los 6 meses
deficiencia selectiva de IgA
Enfermedades de inmunodeficiencia humoral más comunes
Tanto la IgA como la sIgA séricas disminuyeron.
A menudo se acompaña de infecciones recurrentes del tracto digestivo y del tracto respiratorio.
en la membrana mucosa
Terapia de reemplazo de gammaglobulina
inválido
enfermedad de inmunodeficiencia variable común
Enfermedad de inmunodeficiencia de células B
Debido a una función defectuosa de las células B y a una señalización anormal
enfermedad de inmunodeficiencia humoral
Síndrome de Bruton
Deficiencia primaria de células T
síndrome de hipoplasia tímica congénita
enfermedad de inmunodeficiencia celular
Síndrome de DiGeorge
A menudo se acompaña de insuficiencia paratiroidea.
Susceptibilidad a infecciones virales y fúngicas.
Porque ni la inmunidad celular ni la humoral funcionan
Deficiencia de la función inmune celular
Inmunodeficiencia humoral
Porque se necesitan células T CD4 (células Th)
El trasplante de timo embrionario es eficaz
enfermedad por deficiencia fagocítica primaria
granuloma crónico
Anormalidades en el número, movimiento o función de adhesión y actividad bactericida de los fagocitos.
Infecciones recurrentes con bacterias u hongos purulentos.
La deficiencia de G-6-PD puede causar
Debido a la falta de G-6-PD, los macrófagos tienen un suministro de energía insuficiente y una fagocitosis y una capacidad de destrucción reducidas.
neutrófilos
La capacidad de quimiotaxis disminuyó significativamente
Síndrome de Chediak-Higashi
Síndrome de leucocitos de Lasy
Infección crónica cutánea y mucosa por Candida albicans
Prueba cutánea de Candida albicans
diabetes
quemar
recién nacido normal
La capacidad fagocítica se reduce significativamente.
Deficiencia de complemento o anticuerpos
Disminución del metabolismo enzimático.
granuloma crónico
La tasa positiva de la prueba NBT aumentó significativamente
septicemia
deficiencia de complemento
Defecto de la molécula inhibidora C1
angioedema hereditario
infecciones bacterianas recurrentes
No es un virus
Con lupus eritematoso sistémico y nefritis crónica.
No necesariamente
Inmunodeficiencia combinada grave (SCID)
El paciente desarrolló discapacidades del desarrollo 6 meses después del nacimiento.
Susceptible a infecciones graves y muerte.
enfermedad de inmunodeficiencia combinada grave ligada al sexo
X-SCID
Herencia recesiva ligada al cromosoma X
células T
falta o significativamente reducida
células B
Normal pero disfuncional
Provoca una reducción de la producción de Ig y un trastorno de conversión de tipo.
deficiencia de adenosina desaminasa
Deficiencia de adenosina desaminasa (ADA)
herencia autosómica recesiva
principio
La deficiencia de enzimas perjudica la descomposición de la adenosina y la desoxiadenosina.
Provoca grandes cantidades de almacenamiento de metabolitos de nucleótidos dATP y dGTP.
Efectos tóxicos sobre las células T y B tempranas.
Causa defectos de células T y células B.
significación clínica
Después de la vacunación infantil con vacuna BCG
Se produce una infección mortal y diseminada.
enfermedad de inmunodeficiencia secundaria
Síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA)
SIDA
Infectar
células T CD4
principal
Macrófagos
Células dendríticas
células B
Microglía en el tejido cerebral
índice
Anticuerpos VIH positivos
Susceptibilidad a la neumonía por Pneumocystis carinii
Inversión de la relación CD4/CD8
sarcoma de Kaposi
Aumento de células B e inmunoglobulinas.
prueba de detección preliminar
método ELISA
Prueba de confirmación
inmunotransferencia
prueba
Inmunoensayo humoral
Detección de defectos de células B
Inmunoensayo celular
Detección de defectos de células T
prueba cutánea
antígeno
Sustancias que se sensibilizan fácilmente por contacto en el medio natural.
tuberculina
Candida albicans
tricomicina
Estreptoquinasa-Estreptoquinasa (SK-SD)
virus de las paperas
prueba
Pruebas simultáneas de varios antígenos.
Positivo
Prueba cutánea positiva para más de 3 antígenos.
Niños menores de 2 años
un antígeno positivo
Negativo
Positivo para menos de 2 antígenos
Diámetro de reacción de 48 horas.
<10 mm
pista
Inmunodeficiencia o capacidad de respuesta reducida
Prueba de estimulación de PHA
función inmune celular no específica
PHA-L: fitohemaglutinina
PHA estimula la prueba de proliferación y transformación de linfocitos
Determinar la función de las células T
Prueba de proliferación y transformación de linfocitos.
Recién nacido una semana después
Se produce una reacción de irritación de PHA.
Descartar la posibilidad de una inmunodeficiencia celular grave.
SIDA
Invade principalmente las células CD4 (células T colaboradoras Th)
gp120 se une a la proteína del receptor CD4
Relación CD4/CD8 disminuida
Deficiencia de la función inmune celular
Enfermedad por deficiencia de fagocitosis
Capacidad bactericida intracelular de los neutrófilos.
Prueba de reducción de nitro azul tetrazolio (NBT)
Positivo aumentó significativamente
septicemia
Prueba de función de quimiotaxis
Método de cámara de Boyden
Quimiotaxis en una habitación pequeña.
fagocitosis de macrófagos
Prueba de eliminación de partículas de carbono
enfermedad inmunoproliferativa
Enfermedades causadas por una proliferación anormal de linfocitos.
enfermedad de células plasmáticas
Causado por una proliferación excesiva de células plasmáticas o linfocitos B productores de Ig.
Cantidades excesivas en suero u orina
inmunoglobulina monoclonal
o fragmentos de cadena ligera o pesada
plasmocitoma
Reducción de la síntesis de IL-4, inhibición de la activación de las células B e inhibición de la capacidad de presentación del antígeno APC
enfermedad de cadena pesada
Mutaciones y proliferación anormal de células plasmáticas.
sólo puede producir
Cadena pesada de inmunoglobulina o cadena pesada defectuosa
Grandes cantidades en suero u orina
Enfermedades causadas por cadenas pesadas libres de inmunoglobulinas.
enfermedad maligna de células plasmáticas
enfermedad de cadena ligera
Las células plasmáticas mutadas producen grandes cantidades de cadenas ligeras anormales.
Exceso de depósitos de cadenas ligeras en los riñones y otros tejidos viscerales.
Provoca daño renal y amiloidosis.
Los tipos de proteínas de cadena ligera se dividen en tipo lambda y tipo k.
La nefrotoxicidad tipo lambda es más fuerte
Proteinemia M tipo K
Relación tipo K/λ en suero
>4:1
Clasificación
enfermedad maligna de células plasmáticas
Mieloma múltiple (MM)
Tumor maligno caracterizado por la proliferación anormal de una única línea de células plasmáticas en la médula ósea.
tumores de células B maduras
macroglobulinemia primaria
enfermedad de cadena pesada
enfermedad benigna de células plasmáticas
Igemia monoclonal benigna primaria
HiperIgemia monoclonal secundaria
manifestaciones clínicas
Proteinuria por rebosamiento/proteinuria prerrenal
= cadena ligera de inmunoglobulina
= proteína B-J urinaria/BJP/proteína semanal/aglutinina/cadena ligera de inmunoglobulina
Hiperplasia de células plasmáticas monoclonales
Inmunoglobulina monoclonal (proteína M)
síndrome de hiperviscosidad
Aumento de la velocidad de sedimentación globular
Proteína urinaria
bloqueo de los túbulos renales
que conduce a insuficiencia renal
Las células plasmáticas invaden la médula ósea.
Provoca destrucción de la médula ósea, dolor de huesos (más comúnmente) o fracturas.
hipercalcemia
Anemia, infección, sangrado, disfunción inmune.
Debido a que las células normales de la médula ósea no pueden producir
Pruebas de laboratorio
Detección cuantitativa de inmunoglobulina sérica (proteína M)
Proteína M
proliferación monoclonal de células plasmáticas
Clase, subclase, genotipo e idiotipo homogéneos.
inmunoglobulina
Sin actividad de anticuerpos
Ninguna otra actividad inmunológica
Más común en
Mieloma múltiple, hipergammaglobulinemia, linfoma maligno, enfermedad de cadenas pesadas, enfermedad de cadenas ligeras
Aumento de la concentración de proteínas totales y aumento de la proteína M.
La IgG es la más común.
Aumento de IgA
prueba de detección preliminar
inmunodifusión unidireccional en agar
inmunoturbidimetria
Detección de proteína de cadena ligera en orina.
Proteína de la semana (BJP)
Cadena ligera de inmunoglobulina (proteína M)
condensación
prueba de detección preliminar
Método de precipitación-disolución térmica.
Bajo la condición de PH: 4,9 ± 0,1
Calentar a 40-60 ℃
se produce la coagulación
Aumentar a 90-100 ℃
redisolver
Reducir a 56 ℃
Resolidificar
Puede ser negativo en sangre.
Porque la proteína de esta semana tiene un peso molecular pequeño
Se excreta fácilmente por los riñones.
Electroforesis de zona sérica
usar
Membrana de acetato de celulosa y electroforesis en agarosa.
banda de proteína M
banda proteica estrecha y densa
en la zona r (a veces en la zona beta o a)
Los métodos de prueba cualitativos y de detección preliminar más básicos y preferidos.
No se puede determinar correctamente el tipo de inmunoglobulina.
inmunoelectroforesis
Sólo podemos estimar qué tipo de Ig es.
No se puede confirmar
electroforesis de inmunofijación
Prueba confirmatoria de proteína M.
método más utilizado
Identificación cualitativa y tipificación de anticuerpos monoclonales.
Metodo preferido
Identificación de tipos de cadenas ligeras de proteína M.
método más utilizado
subtema
enfermedad autoinmune
concepto basico
Tolerancia inmune
a los propios tejidos y componentes celulares
Sin respuesta inmune
generar una respuesta inmune mínima
Tiene efecto estabilizador inmunológico.
Pueden existir trazas de autoanticuerpos y linfocitos sensibilizados en el suero humano normal
autoinmune
La tolerancia inmune está alterada.
Generar una respuesta inmune a los autocomponentes.
La presencia de autoanticuerpos o linfocitos T sensibilizados.
enfermedad autoinmune
Los autoanticuerpos o los linfocitos T sensibilizados pueden producir respuestas inmunitarias con los correspondientes autocomponentes
Daño a tejidos y órganos o causar disfunción debido a la respuesta inmune.
Clasificación
enfermedades autoinmunes específicas de órganos
limitado a un determinado órgano o tejido
Tiroiditis crónica, tiroiditis de Hashimoto.
Enfermedad de Addison (insuficiencia suprarrenal crónica primaria)
Miastenia gravis, gastritis atrófica
Púrpura trombocitopénica idiopática, anemia hemolítica autoinmune
Plaquetas y glóbulos rojos específicos.
enfermedades autoinmunes no específicas de órganos
Un grupo de enfermedades que invaden múltiples tejidos, órganos o sistemas.
Lupus eritematoso sistémico (LES), artritis reumatoide (AR), enfermedad de Sjogren (SS)
Característica común
La mayoría de las causas son desconocidas.
Muchas veces sin incentivo
espontaneidad
idiopático
Mayormente mujeres
Más mujeres que hombres
Más ancianos que jóvenes
genéticamente predispuesto
Linfocitos T sensibilizados con autoanticuerpos o células de tejido autólogo
Las enfermedades pueden superponerse
incurable
Ataques y remisiones alternados.
autoantígeno
Liberación de antígenos crípticos.
Esperma, contenido de los ojos, cerebro, etc.
Quienes no han estado en contacto con el sistema inmunológico, el sistema inmunológico no lo sabe.
Oftalmía simpática
Un globo ocular herido, contenido liberado
El cuerpo también atacará al otro ojo bueno.
cambios en la propia composición
IgG desnaturalizada
Estimula al cuerpo a producir anticuerpos IgG anti-desnaturalizados (factor reumatoide RF)
artritis reumatoide
Reactividad cruzada causada por antígenos comunes.
fiebre reumática
Proteína M en estreptococos hemolíticos del grupo A.
Igual que los antígenos de la membrana basal endocárdica, articular y glomerular.
causar reacción cruzada
glomerulonefritis aguda
fiebre reumática
Enfermedades autoinmunes comunes
Reacción de hipersensibilidad tipo I
II reacción de hipersensibilidad
Miastenia gravis
autoantígeno
receptor de acetilcolina
mecanismo
Los autoanticuerpos se unen a los receptores de acetilcolina en la unión neuromuscular.
Interiorizado y degradado
Provoca una menor capacidad de respuesta de las células musculares a la acetilcolina liberada por las neuronas motoras.
Provoca debilidad del músculo esquelético.
Hipertiroidismo (enfermedad de Graves)
autoantígeno
Receptor de la hormona estimulante de la tiroides (TSHR)
Anticuerpos contra los receptores de TSH
mecanismo
bocio tóxico difuso
Reacción de hipersensibilidad tipo III
Lupus eritematoso sistémico (LES)
autoantígeno
antígeno nuclear
Ácidos nucleicos, nucleoproteínas, histonas.
autoanticuerpos
anticuerpos antinucleares (ANA)
mecanismo
Los complejos inmunes se depositan en
Tejido conectivo cardiovascular, membrana basal glomerular, serosa, sinovial articular y paredes de pequeños vasos sanguíneos de los órganos.
activar el complemento
Atraer la infiltración de neutrófilos
Características
Más común en mujeres jóvenes
Multiórgano acumulativo, multisistema
rostro
Eritema de mariposa
piel
eritema anular
Fotosensibilidad, fiebre, erupción.
Daño renal (glomerulonefritis), enfermedad cardiovascular.
anemia, síntomas psiquiátricos
Artralgia, serositis
complementar
periodo activo
debido a la sobreactivación
caídas de nivel
Después de la estabilización
mayor reactividad
autoanticuerpos
anticuerpos antinucleares (ANA)
La mayoría de las enfermedades autoinmunes son positivas.
Se encuentra principalmente en LES no tratado.
Principalmente tipo IgG
No es específico de órgano o especie
Reacciona con los núcleos celulares de todos los animales.
Clasificación
anticuerpos anti-ADN
anticuerpos antihistonas
Anticuerpos anti-no histonas
anticuerpos antinucleolares
Detección
inmunofluorescencia indirecta
anticuerpos anti-ADNbc
Anticuerpos anti-ADN de doble hebra
Pertenece a los anticuerpos antinucleares (ANA)
Anticuerpos específicos y característicos.
Ocurrencia frecuente durante los períodos activos.
método
Trypanosoma equi o mosca verde
matriz antigénica
inmunofluorescencia indirecta
El método más específico, sensible y comúnmente utilizado.
anticuerpos anti-Sm
autoanticuerpos característicos
Artritis reumatoide (AR)
autoanticuerpos
tipo
Factor reumatoide (FR)
Segmento Fc de IgG desnaturalizado
Autoanticuerpos dirigidos a antígenos.
Principalmente tipo IgM
IgA, IgG, IgE
Un resultado negativo no descarta la AR
Anticuerpos antiqueratina (AKA)
signos de pronóstico
título alto
La condición es más grave.
Anticuerpos citrulinados anticíclicos (anticuerpos anti-CCP)
Altamente específico
El diagnóstico temprano puede resultar positivo.
Método de detección de RF
Prueba de aglutinación de partículas de látex
método indirecto
Sólo puedo comprobar IgM
ELISA
RF para diferentes tipos de Ig
Se utiliza IgG de conejo como antígeno recubierto en el soporte de fase sólida.
Combinado con la muestra a analizar.
Agregue IgG, IgM, IgA e IgE antihumanas marcadas con enzimas respectivamente
RF como antígeno puente
Síndrome de Sjogren (SS)
también conocido como
síndrome de Sjogren
característica
Disfunción de las glándulas secretoras
Sequedad de piel y mucosas.
Las glándulas lagrimales y salivales son las más comúnmente afectadas.
Ojos y boca secos
dividido en
primario
Tejidos acumulativos distintos de las glándulas exocrinas.
Secundario
Anticuerpo de bandera
anticuerpos anti-SSA/Ro
anticuerpo anti-SSB/La
Polimiositis (PM) y dermatomiositis (DM)
polimiositis
Principalmente daño muscular.
dermatomiositis
Daño muscular y daño en la piel.
Anticuerpo de bandera
Jo-1
Pateé mi piel con mis pies.
PM-1
Esclerodermia (Scl)
Enfermedad sistémica
Esclerosis sistémica progresiva (PSS)
Actuación
La piel se vuelve más tersa y dura.
Anticuerpo de bandera
anticuerpo anti-Scl-70
Sé duro con tu esposa (7)
Método de detección de anticuerpos antinucleares totales (ANA totales) en suero
Ensayo de inmunofluorescencia indirecta (IIF)
antígeno
células HEp2
Células cancerosas de cabeza humana, ricas en componentes nucleares
Reacciona con suero probado.
Luego agregue IgG antihumana (anticuerpo secundario) marcado con FITC
El mas efectivo
Patrones de fluorescencia e importancia clínica.
tipo homogéneo
Alta potencia
Visto en el lupus eritematoso sistémico (LES)
Tipo de membrana periférica/nuclear
Alta potencia
Sólo se ve en LES
Especialmente durante el período activo SEL
Actividad rápida de la enfermedad.
Más común
tipo manchado
Enfermedad mixta del tejido conectivo (EMCT)
puntos mixtos
tipo nucleolar
Esclerodermia (SCL)
gente de corazón duro
Reacción de hipersensibilidad tipo IV
Respuesta de las células T a los autoantígenos.
mediada por células T autorreactivas
Diabetes tipo 1
La presencia de células T autorreactivas en pacientes.
CD8 CTL
células Th1
Pruebas de autoanticuerpos comunes
Perfil de anticuerpos anti-ENA
ENA
Nombre general de los antígenos cigogénicos extraíbles.
Disponible en solución salina o tampón fosfato.
Extraelo
Ana no puede
Anticuerpos ENA
Principalmente IgG
Método de detección
inmunotransferencia
significación clínica
No incluye anti-ADN bicatenario (anticuerpos anti-ADNds)
Porque es de ANA
Detección de otros autoanticuerpos.
Anticuerpos anticitoplasma de neutrófilos (ANCA)
vasculitis
Antígeno diana de anticuerpos perinucleares (pANCA)
Mieloperoxidasa (MPO)
Específico de mieloide
Entonces alrededor del núcleo
Antígeno diana de anticuerpos citoplasmáticos (cANCA)
Proteasa-3 (PR3)
Anticuerpos antimitocondriales (AMA)
Cirrosis biliar primaria (CBP)
Anticuerpo antifosfolípido (APLA)
Incluye anticuerpos anticardiolipina (ACLA)
Estado de hipercoagulabilidad de la sangre.
trombosis
ACLA
Las mujeres con LES tienen más probabilidades de desarrollar coágulos sanguíneos
El aborto espontáneo es propenso a ocurrir durante el embarazo.
Anticuerpo antimúsculo liso (ASMA)
Hepatitis autoinmune (HAI)
Ensayo de inmunofluorescencia indirecta (IIF)
como sustrato
Células del hígado de mono
Tejido de riñón, estómago o hígado de rata
Anticuerpos antitiroglobulina (ATGA)
Tiroiditis de Hashimoto (HT)
Anticuerpo anticélulas parietales (PCA), anticuerpo antifactor intrínseco
gastritis atrófica
anemia perniciosa
enfermedad de hipersensibilidad
reacción de hipersensibilidad
alergia
Después de la respuesta inicial a la sensibilización.
responder de nuevo
disfunción fisiológica
pérdida de células tisulares
Respuesta inmune anormal
defensa inmune
demasiado alto
Reacción de hipersensibilidad tipo I
mediada por anticuerpos IgE
citotropismo
se une a los mastocitos
Hipersensibilidad inmediata/anafilaxia
pocos minutos
principio
Producción de IgE específica de alérgeno después de la respuesta primaria.
Se une a los receptores IgE Fc en los mastocitos
sensibilización
Degranulación de mastocitos sensibilizados durante la re-respuesta
Liberar mediadores bioactivos.
Histamina, leucotrienos
causa
espasmo del músculo liso
Principalmente causado por leucotrienos.
Principales sustancias causantes del asma bronquial.
Aumento de la permeabilidad de los vasos sanguíneos pequeños.
Aumento de la secreción de las glándulas mucosas.
Terminaciones nerviosas sensibles
activación de eosinófilos
Los principales componentes involucrados en la reacción.
Alérgenos
Ciertas drogas
penicilina
alérgenos inhalados
polen, ácaros
alérgenos alimentarios
leche, camarones
Requiere la participación del factor activador de plaquetas.
Anticuerpo
Anticuerpos IgE
También pueden aparecer subclases de IgG.
IgG4
Porque esto no activa el complemento.
Hipersensibilidad tipo I sin afectación del complemento
células participantes
Mastocitos
eosinófilos
Infeccion parásita
Se puede aumentar
basófilos
Síntomas clínicos
fórmula
Tipo I de inicio rápido, mil millones de ácido-base, shock tipo I, asma y alergias.
Mil millones:E:IgE
Sistémico
choque anafiláctico
Causada por medicación o inyección de suero heterogéneo.
Como la antitoxina tetánica, la antitoxina diftérica.
shock anafiláctico por penicilina
la presión arterial cae
Causado por sustancias vasoactivas.
telangiectasia
Infeccion parásita
localidad
reacción alérgica respiratoria
Rinitis alérgica y asma alérgica.
Reacción alérgica gastrointestinal
gastroenteritis alérgica
reacción alérgica de la piel
Urticaria, eccema, angioedema.
Causar daño funcional a los órganos efectores.
pero sin daño patológico sustancial
causando reacciones de hipersensibilidad tipo I
IL3/IL5, IL4
Método de prueba
Prueba de especificidad
Prueba intradérmica de alérgenos
Picarse, rascarse, inyección intradérmica
inyección intradérmica
Prueba cutánea como la penicilina.
control positivo
clorhidrato de histamina
falso positivo
Una gran cantidad de medicamentos hormonales.
falso negativo
Efectos de los antihistamínicos.
proceso
Una jeringa inyecta el extracto de alérgeno en la piel.
El antígeno debe diluirse adecuadamente.
Volumen de inyección
0,01-0,02 ml
sitio de inyección
antebrazo interno
No se puede sangrar ni inyectar por vía subcutánea.
múltiples alérgenos simultáneamente
espaciado
2,5-5,0 cm
Altamente sospechoso y sensible.
5,0 cm
20-30 minutos para observar los resultados.
Sonrojarse (prueba de punción)
Ronchas (prueba intradérmica)
Detección de IgE específica (sigE)
Prueba de adsorción de radioalérgenos (RAST)
proceso
Adsorber alérgenos purificados en vehículos sólidos
Añadir suero para ser probado.
Colocar anticuerpo anti-IgE marcado radiactivamente (anticuerpo secundario)
Detección cuantitativa de niveles de IgE específica en suero.
Como la alergia al suero.
Se requiere inyección de antitoxina tetánica
Inyecciones pequeñas y múltiples.
Reacción de hipersensibilidad tipo II
Citotóxico o citolítico
Veneno tipo II, 23myGod
Los antígenos de la superficie celular diana se unen a antígenos de clase IgG o IgM.
Con la participación del complemento, macrófagos y células NK.
Ingredientes principales
Anticuerpo
IgG o IgM
Implicación del complemento
disolución
células participantes
Macrófagos
Opsonofagocitosis
células NK
efecto ADCC
enfermedad clínica
fórmula
Hipertiroidismo, fuerza muscular, calor y hemorragia.
reacción de transfusión
enfermedad hemolítica del recién nacido
Rh para mujeres embarazadas (-), Rh para el primer hijo ( )
Prevenir la hemólisis fetal en otro embarazo
Dentro de las 72 horas posteriores a la entrega
Inyección de anticuerpos anti-Rh
No importa qué tan rápida sea la velocidad
Enfermedad hemolítica autoinmune (AIHA)
Citopenia alérgica a medicamentos
Púrpura trombocitopénica idiopática (PTI)
Síndrome de nefritis por hemorragia pulmonar (síndrome de Goodpasture)
hipertiroidismo
(La enfermedad de Graves)
Miastenia gravis
(MG)
fiebre reumática aguda
(ARF)
Detección
Prueba de anticuerpos anti-células sanguíneas
Puede ser causado por el antígeno ABO.
Así que aquí tienes todo sobre la sangre.
significación clínica
Ayuda en el diagnóstico de la anemia hemolítica autoinmune.
anticuerpos anti-Rh
Ayuda con la enfermedad hemolítica en recién nacidos causada por la incompatibilidad del grupo sanguíneo Rh.
Estreptolisina O (ASO)
Proteína M de la pared celular estreptocócica
Consistente con el corazón y el glomérulo.
Por lo tanto, estos se combinarán para causar daño.
Enfermedades relacionadas con estreptococos
faringitis
amigdalitis
Otitis media
escarlatina
glomerulonefritis aguda
fiebre reumática aguda
Reacción de hipersensibilidad tipo III
complejo inmune
Complejo inmune soluble de tamaño mediano (IC: IgG, IgM)
Depositado en la membrana basal de los capilares localmente o en múltiples lugares del cuerpo.
activar el complemento
El complemento causa daño a las paredes de los vasos sanguíneos.
Y luego inducir la participación de plaquetas, basófilos y neutrófilos.
Congestión, edema, necrosis local.
Infiltración de neutrófilos
La principal característica de la reacción inflamatoria.
método de memoria
Compuesto tipo III, 23mygod, tercera sesión plenaria
Ingredientes principales
Anticuerpo
IgG,IgM
células participantes
neutrófilos
La causa más potente de daño tisular.
basófilos
Mastocitos
plaquetas
Complejo inmunológico (IC), complejo inmunológico circulante (CIC)
Complejo inmune antígeno-anticuerpo soluble de tamaño mediano
enfermedad
enfermedad por complejos inmunes locales
Reacción de Arthus/Reacción de Arthur
Reacción alérgica local experimental.
Múltiples inyecciones subcutáneas de suero de caballo en conejos.
Después de 4-6 inyecciones
Edema local, hemorragia y necrosis.
Reacción similar a la de Arthus
insulina
Por lo tanto, al inyectar insulina, debe inyectarla en el lugar del paciente.
vacuna
inyección de antisuero
enfermedad sistémica por complejos inmunes
fórmula
Refrescante de riñón Fenglang A
A: reacción similar a la de Arthus
enfermedad del suero
El inicio ocurre 1-2 semanas después de la inyección de suero animal xenogénico.
Fiebre, erupción cutánea, linfadenopatía, inflamación y dolor de las articulaciones y proteinuria transitoria.
Choque inmediato
Reacción de hipersensibilidad tipo I
Glomerulonefritis posestreptocócica
Infección por estreptococos hemolíticos del grupo A
2-3 semanas
Depositado en la membrana basal glomerular.
nefritis por complejos inmunes
Artritis reumatoide
IgG desnaturalizada
Autoanticuerpos anti-IgG = factor reumatoide (FR)
Autoanticuerpos anti-IgG
Principalmente anticuerpos IgM
Ocurre en articulaciones pequeñas.
artritis reumatoide
Ocurre en grandes articulaciones.
lupus eritematoso sistémico
Complejos de ADN y anticuerpos anti-ADN.
Membrana basal de los vasos sanguíneos depositada en los riñones, las articulaciones y otras partes del cuerpo.
Provoca glomerulonefritis, artritis y otros daños a múltiples órganos.
Detección
Detección en la organización
inmunohistoquímica
Detección de complejos inmunes (CIC)
(CIC)
Clasificación
Métodos específicos de antígeno
métodos no específicos de antígeno
A menudo se utiliza clínicamente
Reacción de hipersensibilidad tipo IV
Hipersensibilidad de tipo retardado (DTH)
Células T efectoras (CD4 Th1) (CD8 CTL)
Después de unirse a un antígeno específico
Una respuesta inflamatoria caracterizada por infiltración de macrófagos mononucleares y daño tisular.
Ingredientes principales
antígeno
parásitos intracelulares
Brucella, Mycobacterium tuberculosis, Salmonella typhi
Es tan triste no casarse
Virus, parásitos
material químico
Tintes, pinturas, pesticidas, cosméticos.
droga
penicilina
También puede ocurrir hipersensibilidad tipo I.
células diana
células que albergan Mycobacterium tuberculosis
Células u órganos trasplantados
células tumorales
Proteína a la que está unido el hapteno.
células participantes
células T efectoras
CD4
Th1
CD8
CTL
Macrófagos mononucleares
enfermedad
reacción de hipersensibilidad infecciosa de tipo retardado
Infección por patógenos parásitos intracelulares.
Tuberculosis micobacteriana
tuberculosis cavitaria
Virus
protozoario
dermatitis de contacto
Exposición a sustancias haptenas de moléculas pequeñas.
rechazo de trasplante
reacción huésped versus injerto
HVGR
reacción injerto versus huésped
GHR
Detección
Principio de la prueba cutánea
Inyección intradérmica, parche cutáneo
24-48h
Enrojecimiento local, hinchazón, induración, ampollas, etc.
Objetivo
Detección de reacciones de hipersensibilidad tipo IV
Estado de la función inmune celular.
Prueba de tuberculina (OT)
método
4-8 semanas después de la infección
puede aparecer
Tuberculina antigua (OT) o derivado proteico purificado (PPD) de Mycobacterium tuberculosis
48-72h observación
enrojecimiento, hinchazón o dureza
>5mm
Positivo
Juicio de resultados
<5mm
Negativo
No significa que el paciente esté infectado con tuberculosis.
Porque Mycobacterium tuberculosis es de aparición tardía
5-9/10-19 mm
Positivo
Haber sido infectado con Mycobacterium tuberculosis o vacunado con Bacillus Calmette-Guérin (BCG)
≥20 mm o ampollas o necrosis
Fuerte positivo
Alto riesgo de contraer tuberculosis.
Objetivo
Elija los receptores de la vacuna BCG
Descartar infección tuberculosa
Comprender la función de la inmunidad celular.
prueba de parche cutáneo
Gasa empapada en una solución de alérgenos y colocada en la parte interior del antebrazo o la espalda.
Cubrir con celofán o papel encerado.
24-72h
enrojecimiento, hinchazón, ampollas
Diferencia de prueba cutánea
neumonía infiltrativa
Sombra irregular del pulmón
Fiebre, tos, sangre en el esputo.
diagnóstico
Cultivo de bacilos acidorresistentes de esputo
Diagnosticar tuberculosis
Resumir
fórmula
Tipo I de inicio inmediato, veneno de tipo II, complejo de tipo III, IV de inicio retardado
Anticuerpos y células.
100 millones de fertilizantes ácido-base, 23mygod, la Tercera Sesión Plenaria del Comité Central del PCC, células 4T
enfermedad
Tipo i
Choque Asma y Alergias
Tipo II
Hipertiroidismo, fuerza muscular, calor y hemorragia.
Tipo III
Refrescante riñón Fenglang
Tipo IV
Trasplante de dermatitis de contacto por tuberculosis.
Enfermedades infecciosas
infección bacteriana
infección estreptocócica
Estreptococos grampositivos
Streptococcus pyogenes
Estreptococo beta-hemolítico del grupo A
Método de prueba
prueba de aglutinación de látex
inmunoturbidimetria
Marcadores inmunológicos de uso común.
Antiestreptolisina "O"
ASO
aumentar la altura
Faringitis aguda y otras infecciones del tracto respiratorio superior.
fiebre reumática
Reacción de hipersensibilidad tipo III
miocarditis reumática
artritis reumatoide
pericarditis
glomerulonefritis aguda
Salmonella tiphi
Síntomas clínicos
gastroenteritis autocurativa
Fiebre tifoidea mortal (fiebre entérica)
Método de prueba
respuesta hipertrófica
tan gorda, tan triste
Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas
ELISA
Tuberculosis micobacteriana
tuberculosis
Método de prueba
prueba de tuberculina
Tuberculina antigua (OT)
Derivado proteico purificado de tuberculina (PPD)
Símbolos de la actividad tuberculosa.
anticuerpos anti-PPD
Positivo
infección viral
virus de la gripe
estructura
Hemaglutinina (HA)
Neuraminidasa (NA)
método
Prueba de inhibición de la hemaglutinación
principio
La suspensión del virus se mezcla con el suero (anticuerpo) que se va a analizar.
Tener los anticuerpos correspondientes.
Puede inhibir la unión de la hemaglutinina de la superficie del virus a los glóbulos rojos.
Si agrega glóbulos rojos, ya no se combinarán.
Sin aglutinación
Positivo
virus coxsackie
Puede infectar el cuerpo y estimular el sistema inmunológico del cuerpo.
Atacan las células beta pancreáticas.
causar diabetes
Hepatitis A
Método de detección
ELISA y tecnología de quimioluminiscencia
Detección de HAV-IgM e IgG
IgM
Diagnosticar la infección actual
infección temprana
IgG
Etapa tardía de la infección
infección pasada
Hepatitis B
HBsAg (antígeno de superficie)
apareció antes
HBsAb (anticuerpo anti-HBs)
anticuerpos protectores
HBeAg (antígeno e)
Indica que el VHB se replica activamente in vivo
muy contagioso
HBeAb (anticuerpo anti-HBe)
Capacidad reducida de replicación.
Infectividad reducida
HBcAg (antígeno central)
El VHB está presente y se replica activamente.
indicador directo
Difícil de detectar
HBcAb (anti-HBc)
IgM
Hepatitis B fase aguda e infección temprana
IgG
infección pasada
ADN-HBV
más sensible
más directo
hepatitis crónica activa
manifestaciones clínicas
Tiene antecedentes de hepatitis crónica.
HBc IgM positivo
función hepática anormal
gen de daño
lesión extrahepática
Causado por el depósito de complejos inmunes.
mecanismo de destrucción
Las células CD8 provocan lisis celular al reconocer HBcAg y HLA-I expresados en la membrana celular del hígado.
Pregunta por un sérum doble
Objetivo
Observe si el título de anticuerpos en el período de recuperación es mayor que el de la etapa inicial.
infección congénita
Infecciones recibidas por el feto en el cuerpo de la madre.
llamado colectivamente ANTORCHA
4 artículos de eugenesia y educación.
Toxoplasma gondii (TOX)
Virus de la rubéola (RUV)
Citomegalovirus (CMVH)
Virus del herpes simple (VHS)
Síntomas clínicos
aborto
deformidad
Retraso mental, discapacidad auditiva.
Infeccion parásita
Infección por esquistosoma
reacción de precipitación del huevo anular
Reacción antígeno-anticuerpo
Secreción de miracidios maduros dentro de los huevos (alrededor de los huevos)
Se une a los anticuerpos dentro del suero humano.
Formación de precipitados específicos en forma de burbujas, dedos y tiras con propiedades refractivas evidentes.
Positivo
polietilenglicol
tecnología de hibridoma
agente de fusión
turbidez inmune
Agente que aumenta la turbidez
Purificación de antígenos
método de precipitación de polímeros